[发明专利]多种分析物的离体检测方法与设备

说明书

发明领域

本发明提供快速离体检测抗原、抗体或这两者的方法与设备，或者提供检测例如荷尔蒙、药品或滥用药物之类小分子的方法与设备。该检验方法可以应用于来自鸟类或动物，其中包括人的样品。

本发明的背景技术

US-A-4 407 943涉及利用免疫化学反应检测抗原或抗体，并且说明了可以检验有可能作出诊断结论的特定抗原或抗体存在时的体液样品。免疫化学反应的抗原或抗体可以与不溶性载体材料偶联。为此目的，微孔膜的内表面和外表面涂布一种不溶于水的蛋白质，如玉米醇溶蛋白、胶原蛋白、血纤维蛋白原、角蛋白等，这种蛋白质可提供能够固定各种各样生物活性蛋白质的膜。涂布的膜保持其允许液体流过这些孔的性质。抗原可以固定在膜上，此后，第二种蛋白质也固定在膜上，在提出的检验(例如胎牛血清或牛的γ球蛋白)中第二种蛋白质是免疫化学中性的，并且在膜与蛋白质检验物的混合物接触时基本上中和了非特异性的结合。在所谓的EL-1方法中，抗待检测抗原的抗体固定在膜上，然后膜在抗体存在时与待检验流体接触。其后获取抗原的固定抗原因其结合在适当位置而生成溶液。然后该膜与溶液分离，洗去污染物，再与酶标记的抗体溶液接触，而该抗体是一种抗体和一种酶的共价共轭物，得到如下结构：

C-Ab-Ag-Ab-Enz

式中C代表载体，Ab代表抗体，Ag代表抗原，而Enz代表共轭的酶。另一种EL-2检验得到如下结构：

C-Ag-Ab-AntiAb-Enz

式中AntiAb-Enz代表一种抗体与一种酶的共轭物。整个免疫化学反应在载体以及与载体结合的组分上进行，这些组分可以与能简单除去的未结合的组分分离。

进行上述检验所使用的设备包括一个托盘和一个用于放杯的架，每个杯的下段呈膜形式，抗体或抗原附着在膜上，膜热封在杯的下底上。使用时，样品倒入杯中，通过膜流到托盘，如需要检测样品中是否有特定的物质，可以用试剂洗涤和处理膜。根据特定检验的需要，其中包括待检验样品的流动特性以及该检验中要使用流体的量，选择膜的孔尺寸。流体滴加到膜的上表面可使流体流过膜，在流体滴处在膜顶部时，其膜仅受该滴所施加静压力的控制。如果该滴的尺寸小到足以接近膜的保留体积，该流体将易于流进膜的孔，并被毛细管吸引力保持在那里，直到被另加的流体更换。然后通过样品在膜孔内的停留时间控制反应时间。该检验可以产生可见的颜色变化。

在上述专利中，单一的抗体或抗原覆盖整个膜的表面，未公开将下述性质结合的膜材料：一方面在选定的小区域或部位，可以从含水溶液中沉积抗体、抗原或半抗原的量，在这些区域或部位它们与膜结合得到定位的可读区域，不会不可控制地通过膜散开，另一方面，可以让样品和处理试剂自然地流过膜。为有助于流体以可接受的速度流过膜而希望孔尺寸大些，为能够达到很好的截留它们而希望孔尺寸小些，因此两者之间有冲突。上述检验的具体实例并没有依赖单一重力流过膜，而是使用例如由水泵造成的真空使所需液体流动。没有说明进行多种分析所使用的任何设备。

US-A-4 855 240公开了一种检验装置和夹层检验，该检验无分离培育和洗涤步骤，使用硝基纤维素检验板，其中一部分(以及在特定的分析检验区域)通过检测窗口是可见的。第一条和第二条吸收材料(例如玻璃纤维)提供各自样品通过的流动通道，吸收显色剂到达该检验板一侧，吸收样品比吸收显色剂的点更接近于检验窗口。确定一片吸印迹或其它的高液体吸收容量材料的位置与检验板接触，以便获得和储存检验材料。在显色剂接触粘结剂或样品之前，让样品与检验板上的材料接触。液流从检验板一侧流过另一侧。但是，灵敏度受到有限试剂体积的限制，其试剂可以用于揭示液流沿检验板表面流动的流动形状。没有公开任何洗涤溶液，或许因为印迹纸的液体吸收容量有限，也没有公开多种分析物的检测。

本发明的一个目的是提供一种进行多种分析物(其中包括有一种检验分析物和一种对照分析物的情况，以及有许多检验分析物和一种对照分析物的情况)免疫检验时所采用的方便灵活的方法和设备。

本发明另一个目的是提供进行免疫检验时使用的方法和设备，其中可以使用较大体积的试剂用来提高灵敏度。

本发明的简要说明

本发明提供进行多种分析物免疫检验的设备，其中包括：

(a)一种膜，该膜具有含水液体在其间流过的第一个和第二个面，还具有允许含水液体逐渐地从一个面流到另一个面的微孔结构；

(b)多个通过膜彼此隔开的可读区域，每个区域分别有固定其上的抗原、抗体或半抗原；