[发明专利]降低血浆胆固醇水平的方法和组合物

说明书

本发明涉及通过降低循环的低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)水平来降低血浆胆固醇水平的方法和组合物。

发明背景

冠心病(CHD)仍是工业化国家的主要死亡原因。导致CHD的主要原因是动脉粥样硬化，该疾病的特征是脂类，包括胆固醇在动脉血管壁上沉积，导致血管通道变窄并最终导致血管系统的硬化。

现在普遍认为动脉粥样硬化可能是从动脉内皮的局部损伤开始的，随后是动脉平滑肌细胞从中层增殖到内膜层并伴有脂质的沉积和泡沫细胞在损伤处的聚集。随着动脉粥样硬化斑的生长，它逐渐闭合越来越多的受损血管并可以最终导致局部缺血或梗塞。由于循环脂类如胆固醇的沉积在动脉粥样硬化的开始和发展中起主要作用，因此，确定降低循环胆固醇水平的方法和组合物是非常重要的。

循环脂蛋白作为载体在血浆的含水环境中运送不溶性的脂类如胆固醇酯、甘油三酯和极性更强的磷脂以及未酯化的胆固醇(Bradely，W.A.和Gotto，A.M.：《美国生理学学会》(American Physiological Society)，Bethesda，MD，(1978)117-137页)。这些脂类通过与称为载脂蛋白的蛋白质发生物理缔合而溶解，该脂类-蛋白质配合物称为脂蛋白(Dolphin，P.J.：《加拿大生物化学细胞生物学杂志》(Can.J.Biochem.Cell.Biol.)(1985)63，850-869)。已经从人类血浆中分离出了5种不同类型的脂蛋白：乳糜微粒、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)和LP(a)(Alaupovic，P.：《电泳手册》(Handbook ofElectrophoresis)(1980)Vol.1，27-46页，Havel，R.J.，Eder，H.A.和Bragdon，J.H.：《临床研究杂志》(J.Clin.Invest.)(1955)34，1343-1353)。LDL是人类血浆中胆固醇的主要载体。

食物中的甘油三酯和胆固醇由肠细胞聚集在乳糜微粒颗粒内，该颗粒通过淋巴系统进入循环(Brown，M.S.和Goldstein，J.L Sci.American(1984)251，58-66)。乳糜微粒向外周细胞提供脂肪酸并向肝脏提供胆固醇。然后，肝脏将胆固醇与甘油三酯一起重新包装在另一种称为VLDL的脂蛋白中。

VLDL的功能与乳糜微粒类似，即，向肌肉和脂肪组织提供游离的脂肪酸并向外周细胞提供胆固醇(Brown，M.S.和Goldstein，J.L Sci.American(1984)251，58-66)。在循环系统中，VLDL颗粒中的甘油三酯通过称为脂蛋白脂酶(LPL)的酶水解并通过肝脂肪酶进一步加工，最后将其转变成LDL(Dolphin，P.J.：《加拿大生物化学细胞生物学杂志》(Can.J.Biochem.Cell.Biol.)(1985)63，850-869)。因此，肝脏产生VLDL，LDL的前体。由于VLDL是LDL的前体，VLDL生产的减少将会转变成LDL水平的降低。高浓度的循环LDL与冠心病的发生呈正相关。虽然LDL胆固醇无疑是一个独立的阳性危险因素，但HDL胆固醇却被认为是阴性的危险因素(D.L.Tribble，R.M.Krauss.《内科医学的进展》(Advances inInternal Medicine)(1993)38：1-29)。脱辅蛋白质B

脱辅蛋白质B-100(apoB)是LDL以及LDL受体的配体的主要脱辅蛋白质。ApoB-100是一种分子量(MW)为549,000的大蛋白质。该蛋白质是高度疏水性的，在没有脂类的情况下是不溶性的。已用针对蛋白质上的特定区域(抗原区域或抗原表位)产生的单克隆抗体对apoB-100的结构进行了研究。这些单克隆抗体被用来对apoB-100上与LDL受体结合的位点“作图”。用单克隆抗体对VLDL和LDL中apoB上的各种抗原表位作图是一种了解该蛋白质的各部分在脂蛋白摄取中的作用的有效方法。apoB上的抗原表位对单克隆抗体的免疫反应性的改变与培养物中细胞对LDL的摄取相关(N.F.Galeano等，《生物化学杂志》(J.Biol.Chem.)269卷，no.1，511-519页，1994)。