[发明专利]人肝脏祖先

摘要

本发明公开了分离和低温保藏人肝脏祖先的多种方法,其中包括处理人肝脏组织以提供基本上是单细胞的悬浮液,该悬浮液包含存在于人肝脏的一种或多种细胞谱系的祖先和非祖先;将悬浮液进行缩小体积处理,该步骤显著地减少悬浮液中非祖先的数量从而提供富集祖先的悬浮液,这些祖先显示与一种或多种细胞谱系中的至少一种相关的一种或多种标志;然后从所述的缩小体积悬浮液选择这样的细胞,这些细胞本身、它们的后代或者其更成熟形式表达与一种或多种细胞谱系中的至少一种相关的一种或多种标志。这些标志包括CD14、CD34、CD38、CD45和ICAM。肝祖先的特征为直径6－15μ、二倍体、血型糖蛋白A－、CD45－、AFP+++、ALB+、ICAM+,并且肝祖先亚群在CD14+、CD34++、CD38++、CD117++和ICAM+的表达方面有变化。这些祖先亚群细胞具有所期望的特征在于在肝脏细胞和基因治疗中以及对建立人工生物器官特别有用。

主权项

1.一种提供包含源自人肝脏组织之细胞混合物的组合物的方法，其中所述的混合物包含人肝脏祖先的富集群，该方法包括：(a)提供人肝脏组织的基本上是单细胞的悬浮液，所述的肝组织含有包括未成熟和成熟细胞在内的不同大小细胞的混合物；以及(b)在可以去除成熟细胞和那些相对较大细胞、而同时保留未成熟细胞和那些相对较小细胞的条件下，缩小悬浮液的体积，以提供包含人肝脏祖先富集群的细胞混合物，其中人肝脏祖先本身、它们的后代或者其更成熟形式显示一种或多种表示甲胎蛋白、清蛋白或二者表达的标志。