[发明专利]一种使用微孔识别DNA突变的方法及为此提供的试剂盒

摘要

本发明提供一种使用微孔识别DNA突变的方法及为此提供的试剂盒。该识别DNA突变的方法包括以下步骤使用结合了生物素的引物,制备由PCR扩增的、一部分待识别DNA的结合了生物素的核苷酸序列;制备一个包含与待识别的DNA相对应的正常序列的探针;将探针与微孔的胺基结合;向固定了探针的微孔中加入结合了生物素的核苷酸序列;向微孔中加入一种降解酶以使降解酶与探针的生物素结合;和加入一种将与降解酶反应的底物,并检测由底物降解引起的颜色或吸光度变化。按照本发明,通过使用被PCR扩增的DNA和一个与DNA相对应的正常序列的探针,可以一种经济、安全和简便的方式实现对突变DNA的识别。

主权项

1.一种使用微孔识别DNA突变的方法，其包括以下步骤：(i)使用一个结合了生物素的引物，通过PCR制备一部分待识别的DNA序列的扩增的生物素化的DNA片段；(ii)制备一个包含与待识别的DNA序列相对应的正常序列的探针；(iii)将步骤(ii)中制备的探针固定到微孔的胺基上；(iv)将步骤(i)中制备的生物素化的DNA片段加入到固定了探针的微孔中；(v)为使降解酶与探针捕获的样品DNA片段的生物素部分结合，将一种连接了链霉抗生物素的降解酶加入到微孔中；和(vi)加入一种将与降解酶反应的底物，并检测由底物的降解所引起的颜色或吸光度变化。