[发明专利]ApoAI细胞靶标ELISA筛药系统筛选抗心血管病药的方法

摘要

本发明公开了一种ApoAIELISA间接测定法,该方法灵敏度高,测定浓度范围大,操作简单,便宜的ApoAIELISA间接测定法。以该ApoAIELISA测定法为主体,建立高通量升HDL药筛药系统。通过测定被筛选化合物激发细胞产生ApoAI蛋白的程度来筛选新一代升HDL抗动脉粥样硬化药。

主权项

1.一种酶联免疫法(ELISA)，是间接竞争酶联免疫法测定ApoAI：待测抗原ApoAI与过量抗体混合孵育，反应平衡时抗体以抗原-抗体复合物及游离抗体两种形式存在；将此平衡混合物加入预先经抗原包被的酶标板中，混合物中的游离抗体被板上的抗原捕获，抗原-抗体复合物则经洗板除去；最后加入辣根过氧化物酶底物，经显色反应检测板上抗体的浓度，由此可推知待测抗原浓度，HrpAb2+Ab+Ag→HrpAb2-Ab-Ag+HrpAb2-Ab↓进板HrpAb2-Ab-Ag+HrpAb2-Ab-Ag-Plate↓洗板HrpAb2-Ab-Ag-Plate↓底物(OPD)酶标仪492nm检测HrpAb2—辣根过氧化物酶标记二抗Ab—一抗Ag—抗原Plate—酶标板。