[发明专利]使用突变DNA聚合酶的高温逆转录有效
| 申请号： | 01117024.7 | 申请日： | 2001-04-18 |
| 公开（公告）号： | CN1344802A | 公开（公告）日： | 2002-04-17 |
| 发明（设计）人： | E·S·史密斯;C·M·埃尔夫斯特伦;D·H·格尔范德;R·G·希古赤;T·W·麦尔斯;N·J·索恩布伦纳;A·M·王 | 申请（专利权）人： | 霍夫曼－拉罗奇有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 张广育,谭明胜 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及使用热稳定DNA聚合酶的改进逆转录方法,特别是在镁离子缓冲液中。这些方法在合并逆转录/扩增反应中特别有用。 | ||
| 搜索关键词： | 使用 突变 dna 聚合 高温 逆转录 | ||
【主权项】：
1.逆转录RNA的方法，包括：(a)提供含有所述RNA、引物、二价阳离子和突变热活性DNA聚合酶的逆转录反应混合物，其中所述突变DNA聚合酶的特征在于i)该DNA聚合酶的天然形式中包含有SEQIDNO：1的氨基酸序列；ii)与天然序列相比，所述氨基酸序列中4位氨基酸突变成除E、A、G或P之外的氨基酸；和(b)在足以使所述突变DNA聚合酶起始所述引物的延伸产物合成的温度下处理所述反应混合物，以提供与所述RNA互补的cDNA分子。
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