[发明专利]用于构建T载体的DNA序列及用该序列制备T载体的方法无效
申请号: | 01129855.3 | 申请日: | 2001-11-02 |
公开(公告)号: | CN1344795A | 公开(公告)日: | 2002-04-17 |
发明(设计)人: | 王珣章;贺雄雷;付捷;龙綮新 | 申请(专利权)人: | 中山大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/11;C12N15/52;C12N15/63 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 510275 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种用于构建T载体的DNA序列、含有该序列的载体及其转化为T载体的方法。该DNA序列XcmI的识别序列串联体,两个该序列以反向重复方式插入自身不含XcmI识别位点的载体便得到一前T载体;在超过前T载体10摩尔浓度的外切酶竞争性底物的存在下,用内切酶XcmI过消化前T载体可得到成熟T载体。该方法得到的T载体对经A-tailing操作后的线性DNA片段的一系列克隆测试表明,其克隆效率可达95%甚至更高。这一结果表明该方法得到的T载体具有与目前已商品化的T载体相当甚至更好的克隆效率,而该方法操作简单且具普遍应用价值的优势是传统T载体制作方法无法相比的。 | ||
搜索关键词: | 用于 构建 载体 dna 序列 制备 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于构建T载体的DNA序列,其特征在于该序列是限制性内切酶HphI和XcmI的识别序列串联体,具体序列如下:GGTGACCANNNNT/NNNNTGG,其中N代表任意碱基。
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