[发明专利]以Taq酶对DNA和RNA病原进行同步PCR检测的方法

摘要

本发明涉及一种基因检测技术,具体地说,涉及一种Taq酶对DNA和RNA病原进行同步PCR快速扩增检测的方法。主要是采用蛋白质裂解试剂和煮沸法同步提取病毒核酸DNA和RNA,利用TaqDNA聚合酶本身的聚合酶活性和逆转录活性,以上述过程制备的病毒核酸为模板直接进行PCR扩增,得到所需的各种目的核酸片断;经过电泳或杂交进行基因检测。本发明简化了提取核酸模板和逆转录的过程,节省了试剂成本,大大缩短了检测时间,减少了污染机会,为DNA病毒和RNA病毒的多重PCR技术检测提供一种新方法,不仅适用于多种疾病病原基因的同步检测,更能满足临床实际的需要。

主权项

1、一种以Taq酶对DNA和RNA病原进行同步PCR检测的方法，其特征在于：①蛋白质裂解试剂组成为：1％～10％的十二烷基硫酸钠(SDS)、2～20％NP-40、1～10％吐温-20表面活性剂与Tris或磷酸缓冲液的两两组合，再加入RNA酶抑制剂焦碳酸二乙酯(DEPC)；②采用蛋白质裂解试剂和煮沸法同步提取病毒核酸DNA和RNA；③利用TaqDNA聚合酶本身的聚合酶活性和逆转录活性，以上述过程制备的病毒核酸为模板直接进行PCR扩增，得到所需的核酸片断；④得到核酸片断后，经过电泳或杂交进行基因检测；⑤检验流程为模板制备、PCR扩增、检测。