[发明专利]蛋黄抗癌抗体制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种蛋黄抗癌抗体的制备方法,包括针对于肿瘤免疫原的蛋黄多克隆抗癌抗体IgY、抗独特型抗体和肿瘤特异性表达抗原的制备方法,另外还涉及该蛋黄抗癌抗体的用途。本发明主要以产蛋禽类尤其是鸡作为免疫反应器,用一种或多种肿瘤免疫原进行免疫注射,特点是多种免疫原单独或多种联合进行禽类尤其是鸡的免疫注射,其产蛋中即有针对于上述肿瘤免疫原的多克隆抗癌抗体IgY或抗独特型抗体或肿瘤特异性表达抗原中的任一种或其组合物存在和储存。本发明具有成本低、产量高、特异性强、决定簇广并能进行集约化大规模生产的优点,尤其是能避免HAMA反应和异质性问题,且无毒副作用、安全性好。适用于肿瘤的免疫诊断、治疗和预防,尤其适用于肿瘤的主、被动免疫治疗。

主权项

1、一种蛋黄抗癌抗体的制备方法，其特征在于：以产蛋禽类尤其是鸡作为免疫反应器，用一种或多种纯化的或采用基因工程技术重组的肿瘤特异性抗原或疫苗瘤苗或肿瘤特异性DNA或mRNA及其与之相应载体组成的重组体或针对于肿瘤特异性抗原的单克隆或多克隆抗体或肿瘤组织细胞或上述肿瘤免疫原的脂质体复合物作为免疫原，分别单独进行或多种联合进行禽类尤其是鸡的多次重复免疫注射，然后再以不完全佐剂进行追加强化反应，待5-20天后禽类尤其是鸡的产蛋中即有针对于上述肿瘤免疫原的多克隆抗癌抗体IgY或抗独特型抗体或肿瘤特异性表达抗原中的任一种或其组合物存在和储存。其具体步骤包括：a)肿瘤免疫原或其组合物进行多次免疫注射禽类优选为鸡。在此所述的肿瘤免疫原是通过纯化的人类肿瘤抗原或通过灭活的肿瘤细胞或组织、通过基因工程技术重组的肿瘤特异性抗原或疫苗瘤苗、通过提取纯化的肿瘤特异性裸DNA或mRNA及其与相应载体组成的重组体、肿瘤特异性抗原的单克隆或多克隆抗体，另外还包括上述肿瘤免疫原的脂质体微粒甚至是纳米微粒；所述禽类包括鸡、鸭、鹅、鹌鹑，首选是鸡；注射部位包括肌肉、皮下、皮内、血管和生殖腔囊；注射方法包括将上述肿瘤免疫原单独进行注射和多种免疫原联合进行多次重复免疫注射，其中所述的多种肿瘤免疫原联合进行免疫注射包括用不同种类和来源的肿瘤抗原、基因重组肿瘤特异性抗原或疫苗瘤苗、肿瘤特异性裸DNA或mRNA及其重组体中的任一种及其组合物；还包括不同种类和来源的肿瘤特异性单克隆或多克隆抗体中的任一种及其组合物；所述的免疫原注射量为1-2ml(免疫原量10-500μg/ml+等量不完全福氏佐剂，其中抗体Ab1的用量为100～2000μg/ml+等量不完全福氏佐剂)。b)上述肿瘤免疫原用不完全佐剂进行追加免疫反应。c)待5-20天后禽类尤其是鸡的产蛋中即有针对于上述肿瘤免疫原的蛋黄抗癌抗体存在和储存。其中所述的蛋黄抗癌抗体包括针对于上述人类肿瘤抗原、细胞或组织、重组肿瘤抗原或疫苗瘤苗或其脂质体或纳米微粒的蛋黄多克隆抗癌抗体IgY中的任一种或其组合物；针对于肿瘤特异性裸DNA或mRNA及其重组体或其脂质体或纳米微粒的肿瘤特异性表达抗原中的任一种或其组合物；针对于肿瘤特异性单克隆或多克隆抗体或上述蛋黄多克隆抗癌抗体IgY或其脂质体或纳米微粒的抗独特型抗体Ab2α和Ab2β中的任一种或其组合物。