[发明专利]浓缩分泌的重组蛋白的方法和组合物无效
申请号: | 200580039210.0 | 申请日: | 2005-10-03 |
公开(公告)号: | CN101061225A | 公开(公告)日: | 2007-10-24 |
发明(设计)人: | C·H·塔龙;P·A·科卢西 | 申请(专利权)人: | 新英格兰生物实验室公司 |
主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12N9/24;C12P21/02 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 赵蓉民;陆惠中 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 描述了涉及获得分泌的重组蛋白的浓缩制备物的方法和组合物。这些蛋白质以带有壳多糖结合结构域(chitin-binding domain(CBD))的融合蛋白的形式表达。所述融合蛋白能够在壳多糖存在的情况下被浓缩。也描述了:含有修饰的LAC4启动子的穿梭载体;壳多糖酶-阴性宿主细胞;能够在非变性条件下从壳多糖洗脱的CBD;和灭菌的壳多糖,其可以被任选地磁化以促进重组蛋白质的回收。 | ||
搜索关键词: | 浓缩 分泌 重组 蛋白 方法 组合 | ||
【主权项】:
1.得到分泌的重组蛋白质的浓缩制备物的方法,包括:(a)用含有DNA的载体转化宿主表达细胞,所述DNA编码包括壳多糖结合结构域(CBD)和目标蛋白的融合蛋白;(b)在所述宿主表达细胞中表达所述融合蛋白,并从所述宿主表达细胞分泌所述融合蛋白;和(c)通过CBD将所述的分泌的融合蛋白结合到壳多糖制备物,所述融合蛋白能够在非变性条件下洗脱入所需的缓冲液体积,以便得到所述分泌的重组蛋白的浓缩制备物。
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