[发明专利]生产具有靶向基因组修饰的卵母细胞或卵的体外方法无效
申请号: | 200580043072.3 | 申请日: | 2005-12-19 |
公开(公告)号: | CN101175858A | 公开(公告)日: | 2008-05-07 |
发明(设计)人: | J-S·若利;V·瑟姆斯;F·索姆 | 申请(专利权)人: | 国立农业研究所-INRA |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N15/63 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 | 代理人: | 林晓红 |
地址: | 法国*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | 本发明涉及生产具有靶向基因组修饰的非人脊椎动物卵母细胞或卵的方法,还涉及在宿主细胞基因组DNA中随机整合外源核酸序列的方法。 | ||
搜索关键词: | 生产 具有 靶向 基因组 修饰 细胞 体外 方法 | ||
【主权项】:
1.生产具有靶向基因组修饰的非人脊椎动物卵母细胞或卵的体外方法,该方法包括如下步骤:a)在卵母细胞或卵的核中表达核酸内切酶,其特征在于以外源方式引入所述核酸内切酶,其特征还在于所述卵或卵母细胞的基因组DNA具有至少一个所述核酸内切酶的识别位点,该识别位点相应于至少12个碱基对的特异序列,因此允许:(i)该核酸内切酶特异序列固定在所述的识别位点;(ii)在所述的识别位点或在其邻近区,优选地所述邻近区在所述识别位点的100个碱基对以内,通过所述核酸内切酶连续诱发该基因组DNA双链断开,然后(iii)通过同源重组机制修复所述的双链断开;以及b)鉴定具有所需靶向基因组修饰的卵或卵母细胞。
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