[发明专利]高质量核酸的无细胞生物合成及其用途无效
| 申请号： | 200580046723.4 | 申请日： | 2005-12-12 |
| 公开（公告）号： | CN101103122A | 公开（公告）日： | 2008-01-09 |
| 发明（设计）人： | 陈寅;弗雷德里克·肯德希;弗兰克·瓦兹奎斯;马尔科姆·斯考尼克 | 申请（专利权）人： | 西托吉尼克斯公司 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 北京中原华和知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 寿宁 |
| 地址： | 美国德*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了一种改进的能产生大量治疗品质的核酸无细胞扩增方法以及在研究、治疗学和其他的应用中使用该合成的核酸的方法。该方法联合了本领域内几种不同的最先进方法并协调了它们的应用以经济地合成用于治疗目的核酸。其联合了体外滚环扩增、高保真度聚合酶、高亲和性引物以及特别设计用于特殊用途的精简模板。为了表达的目的，模板包含一包括真核启动子的试剂盒、目的基因的编码序列、以及真核终止序列。扩增后，随后根据预期的用途处理多联体，可能包括限制酶消化得到短表达试剂盒产物(SECs)、使SEC(CNAs)环化的连接步骤和/或产生sCNAs的超螺旋化步骤。最终产物包含几乎是非检测水平的细菌内毒素。 | ||
| 搜索关键词： | 质量 核酸 细胞 生物 合成 及其 用途 | ||
【主权项】：
1、一种在无细胞体系中产生高质量核酸的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(a)使反应混合物中的环式模板和一个或多个引物结合，该引物至少与环式模板的一个链互补从而形成模板-引物复合物；(b)以至少一种高保真核酸聚合酶培育模板-引物复合物以产生含有串联排列的环式模板单位的多联体；以及(c)将多联体切割成较小的至少包含一个具有目的基因的送递单位(delivery unit)。
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