[发明专利]一种植物超氧化物歧化酶的制备方法

摘要

一种植物超氧化物岐化酶的制备方法，包括如下步骤：将各原料分别粉碎、打浆；合并上述打浆后的产物，加碱离子液，厌氧发酵；添加饱和缓冲液；将氧化剂和萃取剂加入到发酵容器中，脱水沉淀，过滤，取滤液，厌氧真空冷冻；添加脱水氧化剂，沉淀得到粗品酶，抽滤，离心分离，取沉淀物，真空冷冻干燥；将还原糖培养基添加到上述产物，再添加掩蔽剂，温浴抽滤；取滤液，将脱水氧化剂加到步骤(7)得到的滤液中，厌氧静置，抽滤、离心分离，冷冻真空机干燥，冷冻真空器干燥即得超氧化物岐化酶。与现有技术相比，本发明的优点在于：以廉价中草药与豆粕配合，各取所长，相互协同，经过厌氧发酵，制得卫生无污染具有抑制病菌酶活性很高的SOD，直接可以服用或外涂，并且具有良好的消炎效果。

主权项

1.一种植物超氧化物岐化酶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将洗净的豆粕、龙葵、白英、筋骨草、蛇莓分别粉碎、打浆；(2)合并步骤(1)中的打浆后的产物，添加重量3～4倍于合并后产物、质量百分比为0.5～2％的碱离子液，厌氧发酵1～12个月；(3)发酵完后，添加饱和缓冲液，直至pH值为7～8，厌氧静置4～6小时；(4)添加氧化剂和萃取剂到发酵容器中，脱水沉淀，过滤，取滤液，添加脱水氧化剂，在-10～0℃下，厌氧真空冷冻1～4小时，上述氧化剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的1～100％，上述萃取剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的15～80％，上述脱水氧化剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的15～80％；(5)沉淀得到粗品酶，采用80～400目滤布抽滤，接着离心分离，取沉淀物，于-30～0℃真空冷冻干燥8～72小时；(6)将重量40～60倍于步骤(5)中产物、质量百分比为10～15％的还原糖培养基添加到上述产物，再添加重量0.2～0.3倍于还原糖培养基、质量百分比为1.5～3％的掩蔽剂，在78～90℃条件下温浴，温浴产物温度至65～75℃，取出；(7)在10～20分钟内，冷却至16～20℃，采用400～600目滤布抽滤；(8)取滤液，添加脱水氧化剂，厌氧静置2～4小时，抽滤、离心分离，得到产物，于-30～0℃真空机冷冻干燥24～72小时，再经常温真空器干燥24～72小时，即得超氧化物岐化酶，上述脱水氧化剂添加的量为步骤(7)中抽滤后溶液体积的15～80％，其中步骤(1)中各原料之间的质量比为1～100∶1～100∶1～100∶1～100∶1～100。