[发明专利]检测乙型肝炎病毒前C/BCP区基因突变的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及检测临床血液样品中乙肝病毒(HBV)基因组前C区及核心启动子区域(BCP)突变的方法及试剂盒，特别是涉及以反向斑点杂交技术快速检测HBV基因前C/BCP区突变的方法及所使用的试剂盒。

主权项

1.一种使用反向斑点杂交技术检测HBV基因前C区及BCP区突变的方法，该方法包括：(1)分离提取待检样品中的靶DNA分子；(2)利用小分子标记引物并进行聚合酶链反应扩增靶DNA片段；(3)使特异性寡核甘酸探针与靶核酸在适当的基质上杂交；(4)检测杂交结合物并借以判断靶DNA的突变类型。本发明的特征在于聚合酶链反应扩增体系中使用的正向和反向引物分别是：5’-AGGCATACTTCAAAGACTG-3’(SEQ ID NO：1)和5’-GCTCCAAATTCTTTATAAG-3’(SEQ ID NO：2)，并且杂交反应中使用的寡核甘酸探针分别是：探针1：NH2-5’-AGGTTAAAGGTCTTTGTA-3’(SEQ ID NO：3)探针2：NH2-5’-AGGTTAATGATCTTTGTA-3’(SEQ ID NO：4)探针3：NH2-5’-GCTTTGACACATGGA-3’(SEQ ID NO：5)探针4：NH2-5’-TGGCTTTGGGGCATG-3(SEQ ID NO：6)探针5：NH2-5’-TGGCTTTGGGACATGG-3’(SEQ ID NO：7)探针6：NH2-5’-TGCAACTTTTTCACC-3’(SEQ ID NO：8)探针7：NH2-5’-GGCTTTAGGGCATGG-3’(SEQ ID NO：9)探针8：NH2-5’-GCTTTAGGACATGGA-3’(SEQ ID NO：10)探针9：生物素-5’-TCTTCCAATATCCGGTCCTGTTGAT-3’-NH2(SEQ ID NO：11)。