[发明专利]BAK缺陷型以及BAK和BAX缺陷型哺乳动物细胞中mRNA干扰酶诱导的凋亡的抑制

摘要

核糖核酸酶、抗生素、细菌毒素和病毒抑制蛋白质合成，这导致哺乳动物细胞的凋亡。不清楚BCL－2蛋白家族响应蛋白质合成的中断而调控凋亡的机制。根据本发明，大肠杆菌毒素MazF通过切割细胞mRNA抑制蛋白质合成，从而诱导哺乳动物细胞的凋亡。MazF诱导的凋亡需要促凋亡BAK和其上游调节剂促凋亡BH3－only蛋白NBK/BIK而非BIM、PUMA或NOXA。此外，NBK/BIK或BAK缺陷型细胞对由翻译的药理学抑制和由病毒介导的蛋白质合成的中断诱导的细胞死亡具有抗性。因此，BH3－only蛋白NBK/BIK是响应蛋白质合成中断的BAK依赖性凋亡途径的最上游调节剂。尽管NBK/BIK对于发育不是必需的，但其是被病毒靶向而失活的BH3－only蛋白，这表明其通过凋亡激活在病原体/毒素反应中起着重要作用。

主权项

1.选择性调控哺乳动物细胞的凋亡的方法，该方法包括步骤：a.制备包含编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的分离的核酸序列的第一表达载体；b.制备包含编码mRNA干扰酶拮抗剂多肽、mRNA干扰酶拮抗剂多肽的衍生物或mRNA干扰酶拮抗剂多肽的片段的分离的核酸序列的第二表达载体；c.将第一表达载体导入哺乳动物细胞；d.任意地将第二表达载体导入哺乳动物细胞；e.选择性地诱导编码mRNA干扰酶多肽、mRNA干扰酶多肽的衍生物或mRNA干扰酶多肽的片段的第一表达载体表达，从而诱导细胞的凋亡，和f.任意地选择性地诱导编码mRNA干扰酶拮抗剂多肽、mRNA干扰酶拮抗剂多肽的衍生物或mRNA干扰酶拮抗剂多肽的片段的第二表达载体表达，从而抑制细胞的凋亡。