[发明专利]突变群体的高通量筛选有效
| 申请号： | 200680039266.0 | 申请日： | 2006-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN101313078A | 公开（公告）日： | 2008-11-26 |
| 发明（设计）人： | M·J·T·范艾克;A·J·范图内恩 | 申请（专利权）人： | 科因股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 | 代理人： | 罗菊华 |
| 地址： | 荷兰瓦*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | 揭示了高通量鉴定诱变群体成员中的基因突变的有效方法。所述方法包括DNA分离、集合、扩增、创建库、对库进行高通量测序(优选采用合成测序技术)、鉴定突变以及对群体成员的鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | 突变 群体 通量 筛选 | ||
【主权项】：
1.一种用于在诱变群体成员中检测目标序列中的突变的方法，包括步骤：(a)分离诱变群体每个成员的基因组DNA来提供每个群体成员的DNA样品；(b)集合步骤(a)中获得的DNA；(c)用一对(优选标记的)引物从DNA集合中扩增目标序列；(d)集合步骤(c)的扩增产物来创建扩增产物库；(e)可选的，片段化库中的扩增产物；(f)使用高通量测序测定扩增产物或片段的核苷酸序列；(g)通过聚类/联配片段的序列鉴定突变；(h)对于目标序列的修改的功能筛选鉴定的突变；(i)设计一个直接杂交到鉴定的突变上的引物；(j)用步骤(i)的引物和步骤(c)的引物中的一个扩增步骤(d)的库；(k)鉴定携带突变的群体成员；(l)可选的，通过从步骤(k)中的成员使用步骤(c)的引物扩增目标序列来验证突变并测定扩增产物的序列。
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