[发明专利]酶法水解黄芪皂苷糖基制备黄芪甲苷的方法

摘要

本发明公开一种酶法水解黄芪皂苷糖基制备黄芪甲苷的方法，其特征在于：用酶水解黄芪皂苷糖基制备黄芪甲苷，所述的酶是以黄芪皂苷或黄酮或异黄酮为发酵产酶诱导物，由细菌、链霉菌、霉菌、酵母菌、担子菌发酵制备。用产出的酶(粗制酶或纯化酶)处理黄芪或者黄芪总皂苷，水解含糖基三个和四个的黄芪皂苷糖基，提高了黄芪甲苷的含量，可制备黄芪甲苷含量高的黄芪片、粉末等其他制品，可制备黄芪甲苷含量高的总皂苷，由此可提高黄芪甲苷的提取率。克服了酸碱法处理糖基所存在的对皂甙破坏性大、污染严重、目的性差等缺点，具有无污染、目的性强、转化率高的优点。

主权项

1.一种酶法水解黄芪皂苷糖基，制备黄芪甲苷方法，其特征在于：用酶处理黄芪或者黄芪总皂苷，使含量高的三个或者三个以上糖基的黄芪皂苷糖基水解，转化为含两个糖基的黄芪甲苷；制备高含黄芪甲苷的黄芪制品和高含黄芪甲苷的黄芪总皂苷、或者由此分离提取制备黄芪甲苷，提高黄芪甲苷的提取率。所述的酶是以黄芪皂苷或黄酮或异黄酮为发酵产酶诱导物，由细菌、链霉菌、霉菌、酵母菌、担子菌发酵方法制备；发酵方法可用液态发酵法或固态发酵法。固态发酵产酶之后，用醋酸缓冲液、磷酸缓冲液、Tris缓冲液等常规缓冲液提取酶，即成发酵酶液；液体发酵产酶、除菌、即成发酵酶液；将其发酵酶液中加入硫酸铵或者乙醇沉淀酶蛋白，收集沉淀，用1/10体积的缓冲液溶解沉淀，除杂，即得浓缩的粗酶液；该粗酶液经酶蛋白分离中常用的离子交换树脂柱，色谱主或者电泳方法分离得到经黄芪皂苷转化为黄芪甲苷的纯酶。