[发明专利]通用型基因打靶载体的构建方法有效
| 申请号： | 200710017948.8 | 申请日： | 2007-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN101117636A | 公开（公告）日： | 2008-02-06 |
| 发明（设计）人： | 陈兴启;张涌;孙达权;刘凤军;张玉玲 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 712100陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法，该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)，其中，在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列，将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)分别连入克隆载体pGEM－3Z，合成含有Bsp14071，Nhe1，Not1，Bsu151(Cla1)，Bst11071，Pf12311，Spe1，Pst1，Sac II稀少酶切位点的序列，将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)之间，正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点，从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。 | ||
| 搜索关键词： | 通用型 基因 打靶 载体 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种通用型基因打靶载体的构建方法，其特征在于，该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)，其中，在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列，将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z，合成含有Bsp14071，Nhe1，Not1，Bsu151(Cla1)，Bst11071，Pf12311，Spe1，Pst1，Sac II稀少酶切位点的序列，将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间，正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点，从而便于不同基因作为同源臂插入。
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