[发明专利]一种肿瘤血管新生体外共培养模型

摘要

本发明涉及一种微囊化肿瘤细胞与内皮细胞共培养模型。本发明取肿瘤细胞混匀于2％海藻酸钠溶液中，通过微囊发生器将细胞混悬液喷入100mmol/L氯化钙溶液内胶化，生理盐水洗涤，与0.1％多聚赖氨酸溶液反应，生理盐水洗涤，再与0.15％海藻酸钠溶液反应后，生理盐水洗涤，用55mmol/L的柠檬酸钠溶液液化微囊核心，在CO₂培养箱中培养，微囊化肿瘤细胞直接用于共培养，或冻存，取内皮细胞贴壁培养或三维生长，加入微囊化肿瘤细胞于同一培养液中，共培养，分离肿瘤细胞与内皮细胞，行基因和蛋白检测及培养液细胞因子检测。解决了Matrigel胶方法的局限性、Transwell的缺陷。具有模拟肿瘤细胞与内皮细胞的相互作用的微环境，一次制作，长期使用，降低了科研人力、财力需求。

主权项

1.一种肿瘤血管新生体外共培养模型，其步骤如下：(1)取肿瘤细胞充分混匀于2％海藻酸钠溶液中；(2)通过微囊发生器，将细胞混悬液喷入100mmol/L氯化钙溶液内使其胶化；(3)待微胶珠硬化，生理盐水洗涤；(4)与0.1％多聚赖氨酸溶液反应后，生理盐水洗涤；(5)再与0.15％海藻酸钠溶液反应后，生理盐水洗涤；(6)用55mmol/L的柠檬酸钠溶液液化微囊核心后，置于CO2培养箱中培养；(7)微囊化肿瘤细胞直接用于共培养，或冻存；(8)取内皮细胞贴壁培养或三维生长，加入微囊化肿瘤细胞于同一培养液中，共培养。(9)分离肿瘤细胞与内皮细胞，分别行基因和蛋白检测以及培养液细胞因子的检测。