[发明专利]低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法无效
申请号: | 200710028008.9 | 申请日: | 2007-05-15 |
公开(公告)号: | CN101092601A | 公开(公告)日: | 2007-12-26 |
发明(设计)人: | 林壁润;沈会芳;张晓勇;谢双大;潘群英;高向阳 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N13/00;C12N15/01;C12R1/465 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人: | 李卫东;裘晖 |
地址: | 51064*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法,属于微生物诱变技术领域。该方法如下:在室温下,将灰色变异链霉菌的孢子悬浮液于无菌平皿内涂布均匀,在无菌状态下吹干,使其形成一层菌膜,采用氮离子束注入,然后用无菌水洗下诱变处理过的菌膜,稀释后涂布于含链霉素的高氏一号培养基平板中培养后,选取生长良好的单菌株接种于液体发酵培养基中,培养后选取遗传性状稳定的高产菌株。本发明采用的低能离子诱变技术操作比较简单、安全、方法易行,其诱变效果远较传统的物理化学诱变方法好,该方法诱变得到的灰色变异链霉菌,同原始菌株相比,发酵单位提高20%~90%。 | ||
搜索关键词: | 低能 离子 诱变 灰色 变异 霉菌 选育 万隆 霉素 高产 菌株 方法 | ||
【主权项】:
1、一种低能离子诱变灰色变异链霉菌选育万隆霉素高产菌株的方法,其特征在于包括如下步骤:在室温下,将0.1~0.3mL灰色变异链霉菌的孢子悬浮液于无菌平皿内涂布均匀,在无菌状态下吹干,使其形成一层菌膜,采用能量为10~30Kev的氮离子束,剂量为7.8×1014~28.6×1014ions/cm2的条件下进行脉冲注入,然后用0.5~1.0mL无菌水洗下诱变处理过的菌膜,稀释至103~106倍后涂布于含0.6~1.0μg/mL链霉素的高氏一号培养基平板中,28~32℃培养7~10天,选取生长良好的单菌株接种于盛有100mL液体发酵培养基的摇瓶中,于28~32℃,160~200rpm摇床中培养96~120h,获得诱变的遗传性状稳定的纯灰色变异链霉菌;所述灰色变异链霉菌为模式菌GAAS2507,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC:M203059,保藏时间是2003年7月7日。
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