[发明专利]一种葡甘露聚糖酶的制备方法

摘要

本发明涉及一种葡甘露聚糖酶的制备方法，其特征是以紫外线诱变选育的绿色木霉(Trichoderma viride)CGMCC3.2942为产酶菌株，在固体曲培养基中培养菌曲，所用的固体曲培养基由质量比为1∶2.2～2.3的固体培养基和营养盐水组成，其中的固体培养基由蔗渣65％～73％，麸皮15％～20％，酵母细胞壁10％～15％，魔芋精粉2.0％～4.0％组成，再经过酶液提取，沉淀酶泥，提纯等步骤，得到葡甘露聚糖酶。本发明的工艺简单，设备投资少，成本低，无污染，产品提取纯化易，得到的葡甘露聚糖酶除了能高效降解植物类葡甘露聚糖得到葡甘露寡糖外，更能有效地降解酵母类细胞壁获得酵母葡甘露寡糖。

主权项

1.一种葡甘露聚糖酶的制备方法，其特征包括以下的步骤：(1)菌种培养：选用绿色木霉(Trichoderma viride)CGMCC 3.2942为产酶菌株，斜面培养基培养菌种，得斜面菌种；(2)菌曲培养：将斜面菌种以常规方法制成孢子悬液，并按培养基干重计，每100g固体曲培养基接入孢子悬液8～15mL的接种量进行接种，27～30℃下恒温培养3～5天，得到菌曲，所用的固体曲培养基由质量比为1∶2.2～2.3的固体培养基和营养盐水组成，其中的固体培养基以总质量分数100％计，由蔗渣65％～73％，麸皮15％～20％，酵母细胞壁10％～15％，魔芋精粉2.0％～4.0％组成，营养盐水以总质量分数100％计，含硫酸铵0.45％～0.60％，磷酸二氢钾0.046％～0.060％，硫酸镁0.02％～0.03％，余量为水；(3)酶液提取：将菌曲恒温浸提，过滤除渣，滤液离心去沉淀得上清液为粗酶液；(4)沉淀酶泥：将粗酶液于冰浴中加入冷冻乙醇，沉淀分离，去上清乙醇，留沉淀，得粗酶泥；(5)提纯：将粗酶泥用溶酶洗液溶解后，去沉淀，得葡甘露聚糖酶提纯浓酶液。