[发明专利]一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法

摘要

本发明公开了一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法，其包括以下步骤：(1)从健康大鼠心肺组织中获取远端肺动脉；(2)从该远端肺动脉中提取远端肺动脉内皮细胞，并进行原代细胞培养，获得原代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞；(3)将步骤(2)中得到的原代细胞用PBS溶液清洗后，加入0.3～0.5ml 0.1％～0.2％胰蛋白酶溶液20℃～37℃消化2～3分钟，当细胞出现回缩、细胞间隙增大时，吸除胰蛋白酶溶液，加入5ml混合培养液Ⅱ，轻轻吹灯瓶壁上的细胞，使之形成细胞悬液，接种于新的培养瓶中，每2天换液一次，至细胞生长至对数生长期，即完成传代细胞培养。本发明方法为进一步深入研究肺循环相关疾病、小血管等相关疾病发病机制奠定了条件，提供了丰富的材料来源。

主权项

1.一种大鼠远端肺动脉内皮细胞的培养方法，它包括以下步骤组成：(1)获取远端肺动脉：从健康大鼠心肺组织中获取远端肺动脉；(2)获取原代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞：从取得的远端肺动脉中提取远端肺动脉内皮细胞，并进行原代细胞培养，获得原代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞；(3)获取传代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞：将步骤(2)中得到的原代细胞用PBS溶液清洗后，加入0.3～0.5ml 0.1％～0.2％胰蛋白酶溶液20～37℃消化2～3分钟，当细胞出现回缩、细胞间隙增大时，吸除胰蛋白酶溶液，加入3～5ml混合培养液，使之形成细胞悬液，接种于新的培养瓶中，每2天换液一次，至细胞生长至对数生长期，即完成传代细胞培养，获得传代培养的大鼠远端肺动脉内皮细胞。