[发明专利]从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法有效
申请号: | 200710040590.0 | 申请日: | 2007-05-14 |
公开(公告)号: | CN101307093A | 公开(公告)日: | 2008-11-19 |
发明(设计)人: | 周培根;缪辉南;吴文惠;何培民;蔡春尔;李燕 | 申请(专利权)人: | 上海水产大学 |
主分类号: | C07K1/16 | 分类号: | C07K1/16;C07K2/00 |
代理公司: | 上海智力专利商标事务所 | 代理人: | 瞿承达 |
地址: | 200090*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种从鲨鱼皮中分离纯化生物医学用胶原蛋白的方法。其原料选取鲨鱼皮,操作如下:鲨鱼皮用pH值为7.4-7.6的低浓度磷酸盐缓冲液浸泡冲洗去掉鳞和残肉,切成小块,用去离子水浸泡冲洗3~5次;清洗干净的鱼皮且用原料量五倍的pH值为7.4-7.6的中浓度磷酸盐缓冲液浸泡70~75小时后,匀浆15min,温度为4℃,转速10000rpm,离心15min,取上清液;沉淀重复上一步过程,合并上清液,加硫酸铵至饱和度80%,温度为4℃,转速8000rpm,离心15min,保留沉淀;将沉淀溶在pH值7.0的中浓度磷酸缓冲液中;用G-75,100,150葡聚糖层析上述溶解液,收集蛋白溶出液于温度4℃,转速10000rpm,离心15min,上清液浓缩,冷冻干燥后得生物医学用胶原蛋白。本发明用于从鲨鱼皮中分离纯化生物医学用胶原蛋白的方法。 | ||
搜索关键词: | 鲨鱼 分离 纯化 生物医药 胶原 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1、一种从鲨鱼皮中分离纯化生物医学用胶原蛋白的方法,其特征在于选取原料为鲨鱼皮,制备方法如下:(1)、将鲨鱼皮用pH值为7.4-7.6的低浓度磷酸盐缓冲液浸泡冲洗去掉鳞和残肉,并切成小块,再用去离子水浸泡冲洗3~5次;(2)、清洗干净的鱼皮且用原料量五倍的pH值为7.4-7.6的中浓度磷酸盐缓冲液浸泡70~75小时后,匀浆15min,在温度为4℃,转速为10000rpm,离心15min,取上清液;(3)、再沉淀重复(2)的过程一次,合并上清液,加硫酸铵至饱和度80%,在温度为4℃,转速为8000rpm,离心15min,保留沉淀;(4)、将沉淀溶在pH值为7.0的中浓度磷酸缓冲液中;(5)、用G-75,100,150葡聚糖层析上述溶解液,收集蛋白溶出液于温度为4℃,转速为10000rpm,离心15min,上清液浓缩,冷冻干燥后得到生物医学用胶原蛋白。
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