[发明专利]以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法无效

专利信息
申请号: 200710041123.X 申请日: 2007-05-24
公开(公告)号: CN101096654A 公开(公告)日: 2008-01-02
发明(设计)人: 韩伟;吴明媛;林小娟;姜俊芬 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N5/08 分类号: C12N5/08;A61K38/16
代理公司: 上海交达专利事务所 代理人: 王锡麟;王桂忠
地址: 200240*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明是一种生物工程技术领域的以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法。步骤包括:(1)从骨髓、外周血或脐带血中,用密度梯度离心法分离制备单个核细胞,然后对CD34细胞进行标记,而后对其进行纯化,得到CD34+细胞;(2)将CD34+细胞加入细胞培养基中进行培养,同时加入细胞因子和GST-hDSL重组蛋白,培养后,换入新鲜的细胞培养基并重新加入细胞因子和GST-hDSL重组蛋白再继续培养,得到增殖了的造血干、祖细胞。从CD34+细胞和从总集落数及高增殖潜能集落数来检测,本发明可有效促进人造血干、祖细胞的增殖,并将在生物医药领域得到广泛的应用。
搜索关键词: gst hdsl 重组 蛋白 增殖 人造 干细胞 细胞 方法
【主权项】:
1、一种以GST-hDSL重组蛋白增殖人造血干细胞及祖细胞的方法,其特征在于,具体步骤包括:(1)从髓、外周血或脐带血中取样,用密度梯度离心分离出单核细胞,然后用CD34分离试剂盒对CD34细胞进行标记,采用免疫磁珠技术对CD34细胞进行纯化,得到CD34+细胞;(2)采用含10%-20%胎牛或人血清的细胞培养基对上述CD34+细胞进行培养,加入细胞因子,加入蛋白,培养1周,换入细胞培养基,并重新加入蛋白再继续培养扩增1周,得到增殖了的造血干细胞、祖细胞。
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