[发明专利]建立神经元烟碱型乙酰胆碱亚型受体细胞模型的方法无效
| 申请号： | 200710046149.3 | 申请日： | 2007-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN101157918A | 公开（公告）日： | 2008-04-09 |
| 发明（设计）人： | 殷明;聂惠贞;沈颖华;王泽剑;李佐青 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/85 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 | 代理人： | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址： | 200240*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及的是一种生物技术领域的建立神经元烟碱型乙酰胆碱亚型受体细胞模型的方法。包括如下步骤：①将APP695基因克隆进pcDNA3.1(－)质粒；②将pcDNA3.1(－)－APP695用脂质体方法稳定转染进SH－EP1－α4β2细胞并用筛选抗生素进行加压筛选；③稳定转染细胞克隆APP695 mRNA表达的鉴定；④稳定转染细胞克隆APP695和Aβ蛋白表达的鉴定；⑤稳定转染细胞克隆上烟碱α4β2受体功能鉴定，用膜片钳鉴定稳定转染细胞克隆上烟碱α4β2受体的功能。本发明获得稳定表达烟碱α4β2受体和Aβ的细胞株，建立神经元烟碱型乙酰胆碱α4β2亚型受体和Aβ共表达的细胞模型，是解决对于AD发病及治疗聚焦在烟碱受体亚型的疑难问题，它为此提供了有力工具。为预防和治疗AD的药物提供了有效的途径。 | ||
| 搜索关键词： | 建立 神经元 烟碱 乙酰胆碱 受体 细胞 模型 方法 | ||
【主权项】：
1.一种建立神经元烟碱型乙酰胆碱受体细胞模型的方法，其特征在于，包括如下具体步骤：①表达载体pcDNA3.1(-)-APP695的构建，将APP695基因克隆进pcDNA3.1(-)质粒；②将pcDNA3.1(-)-APP695用脂质体方法稳定转染进SH-EP1-α4β2细胞并用筛选抗生素进行加压筛选；③稳定转染细胞克隆APP695 mRNA表达的鉴定，用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测APP695 mRNA表达；④稳定转染细胞克隆APP695和Aβ蛋白表达的鉴定，用Western-blotting检测细胞克隆APP695和Aβ的表达；⑤稳定转染细胞克隆上烟碱α4β2受体功能鉴定，用膜片钳鉴定稳定转染细胞克隆上烟碱α4β2受体的功能。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海交通大学，未经上海交通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/200710046149.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：多层石制骨灰盒盖
- 下一篇：一种新型打鼠洞的装置
