[发明专利]一种哺乳动物细胞rep表达质粒p5RCM1及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 200710046169.0 | 申请日： | 2007-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN101157919A | 公开（公告）日： | 2008-04-09 |
| 发明（设计）人： | 陈金中;岳扬波;姚纪花;田聆;薛京伦 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/09 | 分类号： | C12N15/09;C12N15/85;A61K48/00 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 20043*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属生物技术和基因治疗技术领域，具体为一种用于哺乳动物细胞内反式提供rep蛋白的表达质粒。该表达质粒具有负反馈调节机制，即在rep达到一定水平后反馈关闭rep蛋白的表达，并且该质粒有自身不整合到宿主基因组的特性。该质粒的特性源于对AAV病毒P5启动子的RBE的定向突变，使其在细胞内可以如野生P5启动子一样具有负反馈作用，但是不像野生P5一样具有整合到基因组的能力，一方面保证rep适度表达，避免rep短期细胞毒性，同时防止自身整合到基因组，提高长期遗传安全性。该质粒可以广泛用于需要适度反式提供rep蛋白的基因操作和基因治疗体系，如AAV病毒包装体系和依赖RBE介导的基因定点整合操作与基因治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 哺乳动物 细胞 rep 表达 质粒 p5rcm1 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1.一种顺式元件P5M273，其特征在于由下述方法制备获得：将DNA序列为SEQ.NO1的野生P5中的RBE通过定向突变，使其保留rep负反馈作用，但是失去自身整合到宿主AAVS1位点的能力，其DNA序列为SEQ.NO2。
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