[发明专利]检测Dkk-1的时间分辨荧光免疫分析方法及其试剂盒无效

专利信息
申请号: 200710046368.1 申请日: 2007-09-25
公开(公告)号: CN101398433A 公开(公告)日: 2009-04-01
发明(设计)人: 盛世乐;黄钢;谢秀兰 申请(专利权)人: 上海交通大学医学院附属仁济医院
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/577
代理公司: 上海智信专利代理有限公司 代理人: 薛 琦
地址: 20000*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种检测Dkk-1的时间分辨荧光免疫分析方法及其试剂盒。该方法包括下列步骤:①固相抗体制备;②铕离子标记抗体制备;③测定方法:基于双抗体夹心的免疫反应。本发明检测Dkk-1具有较高的灵敏度、特异度及稳定性;且分析系统高度自动化,可提高临床检验结果的速度,又可大幅度降低人为误差和增加检出结果的可靠性。
搜索关键词: 检测 dkk 时间 分辨 荧光 免疫 分析 方法 及其 试剂盒
【主权项】:
1、一种检测Dkk-1的时间分辨荧光免疫分析方法,其包括下列步骤:①固相抗体制备:将抗Dkk-1单克隆抗体用缓冲液稀释至1~10mg/L作为包被液,包被反应板,并用封闭液封闭。②铕离子标记抗体制备:选用抗Dkk-1多克隆抗体进行Eu3+标记,抗Dkk-1多克隆抗体与Eu3+标记物Eu3+-DTTA的重量比为1∶0.2~0.5。③测定方法:在步骤①制得的具有固相抗体的反应板上,每孔依次加入Dkk-1标准品或待测样品,加入反应缓冲液室温振荡反应,洗涤液洗涤后加入用反应缓冲液以体积比为1∶100稀释的步骤②制得的标记抗体100-200ul;室温振荡反应后用洗涤液洗涤,最后加入增强液进行荧光检测。
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