[发明专利]制备高纯度单唾液酸四己糖神经节苷脂的方法

摘要

一种制备高纯度单唾液酸四己糖神经节苷脂的方法，工艺步骤包括：(1)用新鲜家畜脑组织制备丙酮粉；(2)将步骤(1)制备的丙酮粉用提取液溶解后搅拌4h～5h，离心分离并收集上清，将上清用低压色谱柱进行纯化获总神经节苷脂；(3)将步骤(2)制备的总神经节苷脂用MonoQ柱层析分离，得纯度90～95％的神经节苷脂GM1；(4)将步骤(3)制备的GM1用疏水柱层析分离，获纯度大于98％神经节苷脂GM1；(5)将步骤(4)制备的GM1水溶液通过5万～10万截留分子量的超滤膜超滤，所得滤液经冷冻干燥制得GM1干粉。此种方法不仅工艺流程简单、操作安全，而且可提高GM1的得率和避免其被磷脂污染。

主权项

1.一种制备高纯度单唾液酸四己糖神经节苷脂的方法，其特征在于工艺步骤包括：(1)用新鲜家畜脑组织制备丙酮粉；(2)制备总神经节苷脂将步骤(1)制备的丙酮粉在常压、室温下用提取液溶解，丙酮粉以克或公斤计量，提取液以毫升或升计量，丙酮粉的质量∶提取液的体积＝1∶3～1∶5，所述提取液为氯仿、甲醇和水的混合液，氯仿体积∶甲醇体积∶水体积＝3～5∶2～5∶1，将丙酮粉溶液搅拌4h～5h，然后离心分离并收集上清，再将上清用低压色谱柱进行纯化，收集到的总神经节苷脂通过减压浓缩至恒重，去除其中有机溶剂；(3)神经节苷脂GM1的MonoQ柱层析分离将步骤(2)制备的总神经节苷脂用MonoQ柱层析分离，洗脱峰分别进行薄层层析检测，收集含有GM1的洗脱液，减压浓缩至恒重，得神经节苷脂GM1；(4)神经节苷脂GM1的纯化将步骤(3)所获神经节苷脂GM1用疏水柱层析分离，洗脱峰分别进行高效液相色谱检测，收集含有GM1的洗脱液，减压浓缩至恒重，获高纯度神经节苷脂GM1；(5)神经节苷脂GM1干粉制备将步骤(4)制备的GM1用水溶解，GM1溶液通过5万～10万截留分子量的超虑膜超虑，所得滤液经冷冻干燥制得GM1干粉，呈乳白色。