[发明专利]红薯生淀粉水解发酵的复合水解酶制备方法

摘要

一种红薯生淀粉水解发酵的复合水解酶制备方法，用于红薯生淀粉水解发酵的复合水解酶制备，涉及复合水解酶的制备技术领域，包括出发菌株3L－0的筛选、3L－1产酶菌株的获取、复合水解酶的制备和将3L－1产酶菌株进行发酵制取糖化酶的工艺；本发明采用先筛选菌株黑曲霉3L－0，再获取3L－1产酶菌，最后获得复合水解酶的方法，发明了一种能在常温下对生淀粉原料进行高效水解的红薯生淀粉水解发酵的复合水解酶制备方法，解决了现有技术在常温下对生淀粉的水解效率较低，从而导致生淀粉原料一步法酒精生产周期长、效率很低的问题，本发明具有杂菌少，在固液分离后还能对醪渣中的少量残余淀粉继续进行水解的特点，结合醪渣固态深层发酵产酒，可使淀粉利用率最终达到95％以上。

主权项

1.一种红薯生淀粉水解发酵的复合水解酶制备方法，其特征在于：第一步：筛选出发黑曲霉3L-0菌株：从大生产中挑选出发酵单位高于10000u/mL的保藏黑曲霉菌株10株，先用筛选培养基进行平板涂布筛选，然后摇瓶筛选，得到出发黑曲霉3L-0菌株；第二步获取3L-1产酶菌株：对获得的出发黑曲霉3L-0菌株进行定点诱变和遗传育种，获得含有多拷贝糖化酶基因的3L-1产霉菌株；第三步用3L-1产酶菌株发酵制糖化酶：先将获得的3L-1产霉菌株经斜面菌种培养获得斜面菌种，然后接种于由红薯淀粉原料制成的种子培养基中，获得种子；再将种子接入由红薯淀粉原料制成的发酵培养基中，获得发酵产物；最后将发酵产物离心分离、真空浓缩、拌料吸附、乙醇沉淀，在50～60℃下真空干燥，获得能够高效水解生料的糖化酶产品；第四步复合水解酶的制备：先取获得的60～80％的糖化酶产品，加入15～25％低温酸性α-淀粉酶、1～5％果胶酶、1～5％纤维素酶、1～5％脱枝酶进行组合；然后将配好的组合在常温下用搅拌器低速混合5～10分钟，最后将其密封包装。