[发明专利]植物中外源基因的瞬时表达方法无效
申请号: | 200710055317.5 | 申请日: | 2007-02-06 |
公开(公告)号: | CN101096682A | 公开(公告)日: | 2008-01-02 |
发明(设计)人: | 王兴智;杨丽萍 | 申请(专利权)人: | 东北师范大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/87;C12Q1/68;G01N33/53;C12N15/29 |
代理公司: | 长春市东师专利事务所 | 代理人: | 刘延军;赵军 |
地址: | 130024吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明为植物中外源基因的表达方法,具体涉及一种根部吸收法,本发明是通过病毒载体介导,农杆菌吸收法将植物根部浸于农杆菌重悬液中,通过根部自然吸收携带有目的基因的病毒载体的菌液来表达外源基因,本发明在一定程度上提高了外源蛋白的表达水平。其操作过程更为简单,快捷,可在更短时间内获得较高水平的外源蛋白的表达,其表达量可占植物总可溶性蛋白的6%以上。能够实现外源蛋白大规模的生产和推广应用,更易于一些急需药用蛋白的快速规模化生产。 | ||
搜索关键词: | 植物 中外 基因 瞬时 表达 方法 | ||
【主权项】:
1、植物中外源基因的瞬时表达方法,其特征是取4-5ml的农杆菌EHA105-30B-GFP重悬液,盛放于5ml离心管中,然后分别将四叶期,五叶期和六叶期的带根小苗的根部直接放入重悬液中,然后将浸染材料在室温28℃,日光、灯光照射16h或黑暗8h中培养,并在紫外灯照射条件下进行连续一周的观察并拍照,对表达绿色荧光蛋白GFP的植株分别提取植物总RNA和总可溶性蛋白,进行RT-PCR水平和蛋白水平Western-Blot上的检测。
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