[发明专利]一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用

摘要

一种分离和固定化酶的免疫磁性微球的制备方法及其应用。涉及利用免疫磁性微球进行酶的分离纯化和固定化的方法。本发明采用生物特异性耦联的方法，将单克隆或多克隆抗体固定于磁性微球载体上，得到可用于分离纯化和固定化酶的免疫磁性微球；该免疫磁性微球可应用于发酵液、细胞裂解液中目的酶的一步分离纯化，以及采用固定化的酶对其底物进行连续的催化反应。与传统的酶的分离纯化和固定化方法相比较，本方法具有新颖、简便、快捷等优点。

主权项

1、一种分离纯化和固定化目的酶的免疫磁性微球的制备方法，其特征在于：将活化后的磁性微球与金黄色葡萄球菌蛋白A溶液反应，采用PBS缓冲液充分洗涤；再将耦联有金黄色葡萄球菌蛋白A的磁性微球与抗目的酶的IgG抗体的多抗血清或者单抗腹水进行吸附连接；经PBS充分洗净后，采用戊二醛或二甲基庚二酸酯将金黄色葡萄球菌蛋白A和IgG交联固定在磁性微球表面，最后加入TBS缓冲液终止反应，充分洗净后即得到可用于目的酶的分离纯化和固定化的磁性微球，其酶的耦联量为1～10mg/mL。