[发明专利]一种生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌及其构建方法无效
申请号: | 200710068168.6 | 申请日: | 2007-04-20 |
公开(公告)号: | CN101063104A | 公开(公告)日: | 2007-10-31 |
发明(设计)人: | 林建平;傅维琦;岑沛霖 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/52;C12P13/00;C12R1/19 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人: | 韩介梅 |
地址: | 310027浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌及其构建方法。该菌是含有类球红细菌的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因的工程菌。构建方法包括以下步骤:1)从类球红细菌的菌液中提取总基因组DNA;2)用聚合酶链式反应扩增出5-氨基乙酰丙酸合成酶基因;3)将扩增出的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因与克隆载体pMD-18T simple连接,进行DNA测序;4)将测序后的目的基因片断与表达载体pET28a连接,构建出重组子pET28a-R.S.hemA;5)将重组子pET28a-R.S.hemA转化至宿主菌中,即可。本发明具有较高酶活的可溶性5-氨基乙酰丙酸合成酶表达,且经优化表达后胞外ALA的产量高达6.6g/L。 | ||
搜索关键词: | 一种 生产 氨基 乙酰 丙酸 工程 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
1.一种生产5-氨基乙酰丙酸的工程菌,其特征在于此菌是含有类球红细菌的5-氨基乙酰丙酸合成酶基因的工程菌,中文名为大肠埃希氏菌,拉丁文学名为Escherichia coli Rosetta(DE3)-pET28a-R.S.hemA,在中国专利局指定的保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCCNo.1939。
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