[发明专利]流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法

摘要

本发明公开了一种流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，包括如下步骤：将新鲜的肿瘤组织制备成单细胞悬液；调节单细胞悬液浓度为±10⁶细胞/100μl；在一个试管中加入上述步骤得到的单细胞悬液，分别按试剂说明的配比浓度加入能够区分不同细胞的荧光标记抗体5－20μl，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；在上述试管中，加入待测蛋白的抗体，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；离心去除上清液，以清除未结合的荧光标记抗体；悬浮细胞后上流式细胞仪检测、分析。该方法可以提高对目标细胞测定的准确度和精确度，并且可以降低测定成本，减少分次实验带来的系统误差。

主权项

1.一种流式细胞术同步检测肿瘤中多种细胞蛋白表达的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)将新鲜的肿瘤组织制备成单细胞悬液；(2)调节单细胞悬液浓度为±106细胞/100μl；(3)在一个试管中加入步骤(2)得到的单细胞悬液，分别按荧光标记抗体的试剂说明的配比浓度加入能够区分不同待测细胞的荧光标记抗体5-20μl，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；(4)在上述试管中，加入待测蛋白的抗体，充分混匀，室温避光反应15～45分钟；(5)离心去除上清液，以清除未结合的荧光标记抗体；(6)悬浮细胞后上流式细胞仪检测、分析多种细胞的蛋白表达。