[发明专利]一种纯化金丝桃素的方法

摘要

本发明公开了一种金丝桃素的纯化工艺。该工艺以金丝桃属植物贯叶连翘、含金丝桃素的其它植物带花的地上部分、上述植物的粗提物或以上植物的花为原料，经溶剂提取、分离、纯化制得含量高于98％的金丝桃素纯品。纯化产物可作为化学标准品、对照品或作为制剂原料使用。

主权项

1、一种金丝桃素的纯化工艺，其特征在于该工艺包括如下步骤：A、提取和富集：取研碎的贯叶连翘药材，用溶剂通过回流、渗漉、浸渍、超声提取或用连续提取法提取；合并提取液，在20～60℃下减压回收溶剂，加水和乙醇稀释至药材重量的3～10倍，并调至含醇量为10％～55％，混匀，离心，得上清液；用95％乙醇浸泡大孔吸附树脂24h后装柱，以95％乙醇洗柱，至流出液加水不再浑浊为止；蒸馏水洗至无醇味；上清液过以上大孔吸附树脂，树脂量为上清液体积的1/8～1/3，树脂吸附饱和后停止上样；用1～2倍树脂体积的水洗脱，弃去水洗液；用浓度低于55％的乙醇洗脱，洗脱液弃去；再用60％～90％乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩至与原料药材的重量比例为1∶0.5～3；B、结晶：将浓盐酸加至浓缩液中使盐酸含量达到1％～5％，于4～5℃冰箱中冷藏放置后粗制金丝桃素即呈黑色粉末状沉淀析出；干燥；C、凝胶柱层析：以上干燥的粗制金丝桃素沉淀以甲醇或吡啶：甲醇＝4-6:94-96的溶液溶解，过滤除去不溶物，过凝胶柱分离；以甲醇或甲醇：水＝5-10：1的溶液或乙酸乙酯∶甲醇＝1∶3-7的溶液为洗脱溶剂，收集其中金丝桃素流分；流分用TLC检识：薄层板为硅胶G板，展开剂为二氯甲烷：丙酮：甲醇＝50～75：10～15：5～10，在365nm紫外灯下趁湿观察，合并相同的组分；D、C18柱层析：C18柱层析所用的填料为不定形或球形的十八烷基键合相硅胶，粒径为50μm或100μm；用超声法、减压抽滤法或通入N2法或这几种方法的结合脱气，除去洗脱溶剂中的氧气；上述凝胶柱分离的组分以3～5倍量体积的甲醇溶解，上C18柱；以甲醇：水＝1-19：1的溶液为洗脱溶剂，溶剂洗脱过程中通入N2，收集其中金丝桃素流分；流分用TLC检识：薄层板为硅胶G板，展开剂为二氯甲烷：丙酮：甲醇＝50～75：10～15：5～10，在365nm紫外灯下趁湿观察，合并相同的流分；E、冷冻干燥：将以上收集的流出液于20℃～60℃下减压回收溶剂，剩余溶液置超低温冰箱中冷冻10h以上，冷冻干燥，得金丝桃素冻干粉。