[发明专利]一种氨基酸生物拆分的新方法

摘要

本发明涉及生物化工领域，尤其涉及一种DL－N－乙酰氨基酸酯直接生物催化水解拆分制备L－氨基酸和D－氨基酸的新方法。以DL－N－乙酰化氨基酸酯为底物，以米曲霉菌Aspergillus Oyzae Lb3085发酵获得包含有酰胺水解酶和酯水解酶的酶制剂为催化剂，用去离子水为溶剂于酶催化反应器中使底物中的L－N－乙酰氨基酸酯水解为L－氨基酸，而底物中D－N－乙酰氨基酸酯酸性水解为D－N－乙酰氨基酸，从而实现拆分。这种“一菌两酶”拆分技术能有效地减少中间操作过程，达到了简捷、清洁的目的。

主权项

1.一种氨基酸生物拆分的新方法，其特征在于，它包括以下步骤：①以米曲霉菌Aspergillus Oyzae Lb3085为菌种，以葡萄糖0.5～4％、豆浆30～65％、玉米浆0.2～3.5％、硫酸镁0.05-0.3％、磷酸氢二钾0.2％为培养基，在21～38℃、pH6.5～8.2左右的条件下发酵15～40h，过滤得湿菌体，冰冻保存；②在烧瓶中依次加入去离子水、湿菌体、0.03-0.10mol/L Mn+2或Co+2或Zn+2溶液和底物及助溶剂，于18～48℃条件下搅拌反应6～15h，控制溶液的pH6.5-8.2，底物与湿菌体的质量比为1∶2～8；③过滤除掉废菌体，调pH至3.0～5.0，乙酸乙酯萃取，水溶液用离子交换树脂处理，洗脱液蒸发浓缩，即可获得对应L-氨基酸；④有机相浓缩回收溶剂后，残余物溶于甲醇，与2M的盐酸一起加热，升温至58～86℃，反应2h，得澄清溶液，调pH至3.8～6.2，浓缩回收甲醇，冷却、过滤即得D-氨基酸；所述底物为DL-N-乙酰化氨基酸酯；所述助溶剂有1，4-二氧六环、二甲亚砜等，加入的量与去离子水的体积比为1∶6～15；所述的湿菌体含水量一般在13～35％；所述的二价的锰盐、钴盐和锌盐通常为氯化物、溴化物、硫酸盐、硝酸盐、醋酸盐等。