[发明专利]专一性寡核苷酸和其在核酸扩增与检测中的用途有效
| 申请号： | 200780031026.0 | 申请日： | 2007-07-17 |
| 公开（公告）号： | CN101506384A | 公开（公告）日： | 2009-08-12 |
| 发明（设计）人： | 劳伦斯·J·王 | 申请（专利权）人： | 布兰迪斯大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12P19/34;C12N9/00;C07H21/00 |
| 代理公司： | 北京律盟知识产权代理有限责任公司 | 代理人： | 孟 锐 |
| 地址： | 美国马*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本文阐述可用于核酸扩增反应中的经标记探针和未经标记寡核苷酸。对这些探针和寡核苷酸加以修饰以相对于其相应的未经修饰对应物改变其对热稳定DNA聚合酶非引物依赖性5’外切核酸酶活性的敏感性。本文也阐述采用这些经标记探针和未经标记寡核苷酸的不对称聚合酶链反应(PCR)扩增和检测方法。本文也阐述包括经标记探针和未经标记寡核苷酸的核酸扩增反应试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 专一性 寡核苷酸 核酸 扩增 检测 中的 用途 | ||
【主权项】：
1、一种不对称聚合酶链反应(PCR)扩增和检测方法，其包含(a)通过包括引物退火温度的重复热循环对反应混合物实施热循环，所述反应混合物含有第一脱氧核糖核酸(DNA)扩增靶序列、第一过量引物和第一限制引物、dNTP、未显示非靶依赖性探针解离的热稳定DNA聚合酶、和低温第一杂交探针，所述第一杂交探针的浓度调节熔融温度比所述第一限制引物的浓度调节熔融温度低至少5℃并且为线性DNA寡核苷酸，其对非引物依赖性5’外切核酸酶解离的敏感性已通过对所述寡核苷酸的结构修饰而改变；(b)使所述探针与第一扩增子链杂交，所述第一扩增子链是在所述限制引物耗尽后所述过量引物于第一温度下的延伸产物；和(c)检测所述探针的杂交。
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