[发明专利]微量mRNA的扩增方法及其应用无效
申请号: | 200780033391.5 | 申请日: | 2007-08-29 |
公开(公告)号: | CN101535475A | 公开(公告)日: | 2009-09-16 |
发明(设计)人: | 野岛博;东岸任弘;奥崎大介 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人大阪大学 |
主分类号: | C12N15/00 | 分类号: | C12N15/00;C12N15/09;C40B50/06 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程凤儒 |
地址: | 日本国*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明为了提供不受碱基序列长度的影响而不论是短的mRNA还是长的mRNA都可同样有效率地扩增的微量mRNA的扩增方法及其应用方法,本发明的微量mRNA的扩增方法包括:向包含微量mRNA的溶液添加虚拟RNA制作混合溶液的第一工序;根据使用混合溶液作为模板的逆转印反应,合成反义DNA的第二工序;对合成后的反义DNA合成互补的正义DNA,形成由正义DNA和反义DNA组成的双链DNA的第三工序;在所形成的双链DNA的正义DNA的5’末端侧连接RNA聚合酶的启动子序列制作扩增用双链DNA的第四工序;以及通过RNA聚合酶,由扩增用双链DNA扩增RNA的第五工序。 | ||
搜索关键词: | 微量 mrna 扩增 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
1. 一种微量mRNA的扩增方法,其特征在于包括:向包含微量mRNA的溶液添加虚拟RNA制作混合溶液的第一工序;根据使用混合溶液作为模板的逆转印反应,合成反义DNA的第二工序;对合成后的反义DNA合成互补的正义DNA,形成由正义DNA和反义DNA组成的双链DNA的第三工序;在所形成的双链DNA的正义DNA的5’末端侧连接RNA聚合酶的启动子序列制作扩增用双链DNA的第四工序;以及通过RNA聚合酶,由扩增用双链DNA扩增RNA的第五工序。
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