[发明专利]用于数字多重PCR测定的装置和方法

摘要

用于数字多重PCR测定的方法和装置使用微流控芯片在芯片的微通道中进行实时、连续流式PCR。将样品材料流导入各微通道并且将测定特异性试剂团(boluses)和缓冲液交替地导入流内以形成顺序配置的受试团。对所述受试团进行PCR方法，然后进行热解链方法(thermal melt procedure)。在热解链方法期间，检测荧光输出和收集荧光对温度的数据并且将其与预期的正常相关性(normalcorrelation)相比较。将阳性或阴性的结果转换成数字格式，其中阳性结果指定为“1”，阴性结果指定为“0”，或反之亦然。

主权项

1.一种方法，该方法用于在微流控芯片的多个通道内进行数字多重PCR测定以鉴定多个患者样品的每一个中的DNA序列变异，从而诊断疾病状态、疾病风险或预测各患者的治疗性药物的反应，所述方法包括：A.对于各患者样品，在通道之一中提供基因组DNA样品流；B.将测定特异性试剂溶液导入基因组DNA样品流以形成受试混合物；C.在通道内对受试混合物进行PCR方法；D.在进行PCR方法后对受试样品进行热解链方法；E.收集关于热解链方法的数据；F.分析收集的热解链数据以确定目的DNA序列变异在受试混合物中的存在或不存在；和G.通过指定表明目的DNA序列变异存在的结果为1和指定表明目的DNA序列变异不存在的结果为0或反之亦然，来将分析步骤的结果转换成数字信号。