[发明专利]结缕草中胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆和功能鉴定无效
申请号: | 200810000775.3 | 申请日: | 2008-01-16 |
公开(公告)号: | CN101381723A | 公开(公告)日: | 2009-03-11 |
发明(设计)人: | 韩烈保;王莹;曾会明;刘君 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学;韩烈保;王莹 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12N15/29;C12N15/82;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 100083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及结缕草中胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆和功能鉴定,其主要步骤包括:以结缕草为植物材料,提取植物总DNA,利用生物软件设计一对特异引物,经过PCR扩增方法获得了Rd29A启动子序列,并以pBI121为基础,分别构建了pBIG(35S-GFP)和pBIRG(Rd29A-GFP)两个植物真核表达载体,采用基因枪法对洋葱表皮细胞进行转化,检测Rd29A启动子在受体细胞中调控GFP基因表达的活性。本发明能筛选出适用于草坪草转基因的诱导型启动子Rd29A,Rd29A启动子是一个受干旱、盐碱和低温等逆境诱导表达的特异性启动子,也是植物抗逆性基因工程中理想的逆境诱导型启动子,对于逆境条件下草坪草的生长发育有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 结缕草中 胁迫 诱导 启动子 rd29a 克隆 功能 鉴定 | ||
【主权项】:
1、结缕草胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆及功能鉴定,其技术体系包括:(1)提取结缕草的总DNA。(2)根据已经在GenBank上发布的Rd29A启动子的序列设计一对特异引物,引入合适的酶切位点,通过PCR扩增出Rd29A启动子基因片断,并进行测序分析。(3)以pBI121表达载体为基础,构建由结缕草Rd29A启动子驱动的GFP基因(绿色荧光蛋白)的植物表达载体。(4)鉴定结缕草Rd29A启动子的功能
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