[发明专利]一种检测大肠杆菌的新型荧光生物传感器的制备方法

摘要

本方法利用磁性粒子负载抗体，捕获抗原，通过水溶性共轭聚电解质诱导产生荧光放大来开发检测大肠杆菌O157:H7的超灵敏荧光生物传感器。首先利用磁粒捕获大肠杆菌O157:H7抗原，产生带荧光标记的抗原抗体结合体。随后加入水溶性共轭聚电解质，利用共轭聚电解质诱导与静电作用，使抗原抗体结合体与共轭聚电解质之间的超分子识别形成超分子荧光复合物体系。该荧光复合物经共轭聚电解质的光或电激发，导致原荧光标记信号产生数千甚至百万倍数量级的超级荧光放大，从而形成超灵敏荧光生物传感器。本生物传感器体系基于水溶性共轭聚电解质的荧光增敏增效，可用于大肠杆菌O157:H7等一些急性传染病菌的快速超灵敏检测。

主权项

1、一种检测大肠杆菌新型的荧光生物传感器的制备方法，包括下述步骤：(a)利用制备好的磁性颗粒经表面生物功能化修饰上二抗，用荧光素标记一抗，带有标记的一抗与二抗结合形成抗体复合物，用抗体复合物处理大肠杆菌0157：H7抗原样品，形成抗原-带标记的一抗-二抗复合体。(b)经过磁分离与洗涤过程后，利用甘氨酸-盐酸缓冲液在一抗和二抗之间水解，形成带负电的荧光标记的抗原抗体结合物。(c)分离后带负电的抗原抗体结合物与阳离子共轭聚电解质(CCP)特异性结合后，形成超分子识别体系，经CCP光激发导致共振能量转移(FRET)，原荧光标记信号出现超级放大，实现荧光生物传感器功能。