[发明专利]新型标签蛋白及其应用

摘要

本发明公开了一种表达目的蛋白的方法，所述方法包括在宿主细胞中表达亮氨酸拉链1、类泛素分子羧基端区域和目的蛋白的融合蛋白；将所述的融合蛋白与含有类泛素分子氨基端区域和亮氨酸拉链2的类泛素分子重建蛋白混合，生成重建产物，用类泛素分子的特异性蛋白酶处理该重建产物，从而获得所述的目的蛋白。本发明还公开了一种用于目的蛋白表达的试剂盒，所述的试剂盒含有：用于表达目的蛋白的构建物，其含有亮氨酸拉链1的编码基因和类泛素分子羧基端区域的编码基因；以及类泛素分子重建蛋白或重建构建物。

主权项

1.一种表达目的蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括：(a)提供一种构建物，从5至3依次含有以下可操作性相连的元件：亮氨酸拉链1的编码基因，类泛素分子羧基端区域的编码基因，和目的蛋白的编码基因；(b)将(a)的构建物转入宿主细胞，从而表达亮氨酸拉链1，类泛素分子羧基端区域和目的蛋白的融合蛋白，分离所述的融合蛋白；(c)提供一种类泛素分子重建蛋白，所述的蛋白含有类泛素分子氨基端区域和亮氨酸拉链2，所述亮氨酸拉链2与亮氨酸拉链1可相互作用形成亮氨酸拉链二聚体；(d)混合(c)的类泛素分子重建蛋白与(b)的融合蛋白，从而生成重建产物，所述的重建产物包含：由亮氨酸拉链1和亮氨酸拉链2相互作用形成的亮氨酸拉链二聚体，重建的类泛素分子，和目的蛋白；和(e)用类泛素分子的特异性蛋白酶处理(d)的重建产物，从而将亮氨酸拉链二聚体和重建的类泛素分子切割下来，分离获得所述的目的蛋白。