[发明专利]云南红药胶囊中毒性成分滇乌碱的质量控制方法

摘要

本发明公开了云南红药胶囊中毒性成分滇乌碱的质量控制方法，属药品技术领域。该方法有制黄草乌生药材的毒性控制、胶囊中滇乌碱含量控制、动物安全性试验控制制黄草乌生药材的毒性、高效液相色谱法检测毒性成分滇乌碱的含量。其制黄草乌生药材的毒性剂量≤2g/kg，滇乌碱含量每粒≤0.01mg，色谱柱：U-bondapaKCN，7.8×300mm；流动相：甲醇-水-氨水(35∶65∶0.5)；柱温30℃；检测波长260nm；流量2mL/min；理论塔板数≥4100。该方法监控手段综合，操作简便易掌握，检测准确度和精确度高，增强了云南红药胶囊毒性成分的可控性，更好地确保了制黄草乌生药材的炮制合格及药品的安全性。

主权项

1、一种云南红药胶囊中毒性成分滇乌碱的质量控制方法，其特征在于由制黄草乌生药材的毒性控制、云南红药胶囊中滇乌碱含量控制、动物安全性试验控制制黄草乌生药材的毒性、高效液相色谱法检测毒性成分滇乌碱的含量四个步骤组成，按以下步骤进行：(1)云南红药胶囊制黄草乌生药材的毒性控制按小鼠每千克体重计，将制黄草乌生药材细粉的毒性剂量控制在≤2g/kg，按步骤(3)操作，小鼠不出现死亡为限量；当小鼠出现死亡时，则将黄草乌生药材按制黄草乌的常规方法进一步炮制，再通过步骤(3)操作，按小鼠每千克体重计，控制其制黄草乌生药材的毒性剂量≤2g/kg；(2)云南红药胶囊中滇乌碱含量控制在每粒≤0.01mg，云南红药胶囊每粒重量为0.25g，当通过步骤(4)检测滇乌碱含量每粒>0.01mg时，则通过步骤(1)和步骤(4)检测控制滇乌碱含量每粒≤0.01mg；(3)动物安全性试验控制制黄草乌生药材的毒性①制黄草乌生药材的动物毒性试验供试药液的制备将制黄草乌生药材粉碎过80目筛，用纯化水配制成混悬液，制黄草乌生药材细粉给药剂量按小鼠每千克体重计，其给药剂量为2g/kg；其药液浓度为0.1g/mL，小鼠给药体积为0.2mL/10g；②取小鼠20只灌胃，给药体积为0.2mL/10g，将上述混悬液一次灌入小鼠胃中，连续观察3d，小鼠不出现死亡，表明云南红药胶囊中制黄草乌的炮制合格；(4)高效液相色谱法检测毒性成分滇乌碱的含量①供试品的制备：取云南红药胶囊100粒，取胶囊中粉末置具塞锥形瓶中，加乙醚50ml及氨试液1mL，密塞，摇匀，放置过夜，滤过；药渣再加乙醚50mL，连续振摇1h，滤过，滤渣再用乙醚洗3-4次，每次20ml，滤过；合并滤液及洗液，60℃以下低温挥干乙醚；残渣加0.05mol/L硫酸液10ml使溶解，移入分液漏斗中，用硫酸液5ml分次洗涤容器，洗液并入分液漏斗中，用乙醚10ml振摇洗涤；酸液加氨试液调PH值至9，再用乙醚提取3次，每次10ml；合并醚液80℃以下低温蒸干；残渣加无水乙醇适量使溶解，移入10ml容量瓶中，用无水乙醇分次洗涤容器，洗液并入容量瓶内，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液；②对照品的制备：精密称取纯度>98.0％的滇乌碱，加无水乙醇制成0.5mg/mL的溶液，作为对照品溶液；③色谱条件：色谱柱：U-bondapaKCN，7.8×300mm；流动相：甲醇-水-氨水，甲醇：水：氨水＝35：65：0.5；柱温：30℃；检测波长：260nm；流量：2mL/min；按滇乌碱峰面积计算，理论塔板数≥4100；④测定方法：分别精密取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，按外标法计算，即得。