[发明专利]一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 200810059790.5 | 申请日： | 2008-02-29 |
| 公开（公告）号： | CN101240290A | 公开（公告）日： | 2008-08-13 |
| 发明（设计）人： | 向太和;徐纪明 | 申请（专利权）人： | 杭州师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/64;A01H1/00;A01H4/00 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 | 代理人： | 沈孝敬 |
| 地址： | 310036浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物技术中的基因工程领域，公开了一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体，以及其构建方法和应用。即利用pBIN19、pGFP和pCHS质粒，通过酶切和重组等方法，构建CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植物转基因表达载体pBIN－35S－GFP。该载体能实现gfp基因的高效表达，并且在CaMV 35S启动子的两端各有一个多克隆位点，可以方便地进行启动子替换，用于研究组织特异性启动子的功能；此外，该载体在gfp基因的5′端含有多克隆位点，在3′端含有EcoR I和Bsm I两个单一酶切位点，可以方便地在5′端连接上目标基因，表达含GFP的融合蛋白，用于研究目标基因编码蛋白的亚细胞定位；也可以方便地切除gfp基因，连上需要的目的基因用于遗传转化研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 绿色 荧光 蛋白 基因 植物 转基因 表达 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
1、一种含绿色荧光蛋白基因的植物转基因表达载体，名称为pBIN-35S-GFP，其特征在于含有农杆菌LB边界序列，并且从此处开始顺时针方向依次连接有细菌操纵子LacZ序列、编码GFP蛋白的基因gfp、CaMV 35S启动子、新霉素-3′-磷酸转移酶Neomycin phosphotransferase-II(npt II)基因、农杆菌RB边界序列、卡那霉素抗性基因(KmR)、细菌起始复制子oriV和oriT序列。
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