[发明专利]一种提取植物DNA的方法

摘要

一种提取植物DNA的方法，它涉及一种提取DNA的方法。它解决了目前植物DNA提取方法都只对含有少量多糖的植物提取材料有效，对多糖含量高的植物或部位基本无效的问题。提取方法：一、植物提取材料用液氮研磨成粉末，然后转入提取缓冲液I中进行水浴，再离心；二、取步骤一离心沉淀物转提取缓冲液II中进行水浴，之后加入氯仿离心；三、取步骤二离心上清液并加入上清液等体积的异丙醇，混匀后离心，再用乙醇洗涤离心沉淀，然后干燥，即得到植物提取材料的DNA。本发明方法是一种可以广泛使用的植物DNA提取方法，它不受植物提取材料多糖含量的影响，在DNA提取过程中可将植物中的多糖彻底去除，提高了DNA提取的效率、纯度和质量。

主权项

1、一种提取植物DNA的方法，其特征在于提取植物DNA按以下步骤进行：一、植物提取材料用液氮研磨成粉末，然后取0.15～0.25g研磨粉末转入1mL提取缓冲液I中在温度为45±1℃的条件下水浴10min，再在10000g条件下离心10min；二、取步骤一离心沉淀物转入0.5～1mL提取缓冲液II中在温度为65±1℃的条件下水浴10min，之后加入0.5～1mL氯仿在12000g的条件下离心5min；三、取步骤二离心上清液并加入上清液等体积的异丙醇，混匀后在10000～12000g条件下离心10min，再用体积浓度为75％、体积为0.5mL的乙醇洗涤离心沉淀2次，然后室温气干，即得到植物提取材料的DNA；其中步骤一中的提取缓冲液I由乙二胺四乙酸、NaCl和去离子水组成，提取缓冲液I中乙二胺四乙酸的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为0.16mol/L；步骤二中的提取缓冲液II由乙二胺四乙酸、NaCl、十六烷基三甲基溴化铵、十二烷基肌氨酸钠、巯基乙醇和去离子水组成，提取缓冲液II中乙二胺四乙酸的浓度为50mmol/L、NaCl的浓度为1mol/L、十六烷基三甲基溴化铵的浓度为2.5g/100mL、十二烷基肌氨酸钠的浓度为0.1g/100mL、巯基乙醇的浓度为1mL/100mL。