[发明专利]有毒有害物急性毒性藻红外测试方法

摘要

本发明提供一种有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，采用叶绿素a含量≥4.0mg·L^－1的敏感藻液和便携式红外测温仪的毒性测试要素，通过选定测试样品的处理和浓度设计，进行对照毒性测试，通过响应温差、响应时间所用不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量、最低响应浓度，确定样品毒性大小。本发明方法灵敏度达到发光细菌法的灵敏度，其平均测试时间与发光细菌法的平均测试时间相近，有毒有害物急性毒性藻红外测试法的测试效果与发光细菌法的测试效果相同。具有测试方便、成本低、专一性强、可现场测试等特点。

主权项

1.有毒有害物急性毒性藻红外测试方法，具体包括如下步骤：敏感藻的准备：以羊角月牙藻作为有机毒物的敏感藻，短线脆杆藻作为重金属的敏感藻，水华鱼腥藻作为农药的敏感藻；对上述敏感藻的叶绿素a含量进行测定：测定敏感藻的叶绿素a含量≥4.0mg·L-1时，培养藻液可用于毒性测试，即以叶绿素a含量≥4.0mg·L-1作为测试藻量标准；测试仪器准备：红外测温仪；分辨率≤0.1℃；测试样品的处理：取待测样品稀释，配制成×5、×10、×102、×103的稀释液待用；毒性测试：根据待测样品的不同，选择准备的敏感藻，在试验组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，待藻液温度稳定时用红外测温仪对准藻液面中心测试并记录所测温度一次，然后用移液管取出待测样品的稀释液0.05ml加入上述藻液中，以后每1.5min测温一次，直到温度变化停止测温记录；如果藻液未响应则依次增加0.5ml稀释液进行测试直到产生响应；同时，在对照组的三个容器中分别加入5ml所述藻液，在藻液中加入0.05ml蒸馏水，立即用前面的测试方法对两组藻液进行测温记录，测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；试验组重复三次，对照组重复三次；测试顺序从毒物的低浓度向高浓度逐一进行；当确定第一次响应浓度后，再将该浓度样品液按×102、×10或×5进行稀释测试，测试顺序从高向低稀释倍数逐一进行；毒性判断：毒性的响应温差的平均温差值＝(试验组温度之和-对照组温度之和)÷3，其绝对值≥0.2℃的最大平均温差值来确定供试藻对毒物毒性的显著响应；用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度及加入量来确定敏感藻对样品的响应剂量；确定最低浓度：用各不同样品稀释浓度测试时最先出现温度响应的样品稀释浓度确定敏感藻对样品的最低响应浓度；确定样品毒性大小：根据测试得出的最低剂量、最低浓度，以及测试得出的响应时间大小来确定测试样品的毒性大小。