[发明专利]一种基因稀有突变的定量检测方法

摘要

一种基因稀有突变的定量检测方法，涉及一种基因的检测方法，尤其是涉及一种基因稀有突变的定量检测方法。提供一种基因稀有突变的定量检测方法。1)根据需要定量检测的基因稀有突变，设计并制备相应的引物序列，引物的3’末端为突变位点特异核苷酸，除了最后一位核苷酸，其余序列均可通过商业合成，最后一位核苷酸为修饰核苷酸，使引物在常规PCR反应中无法延伸，修饰核苷酸添加至引物末端；2)在含有特定DNA聚合酶和焦磷酸的反应体系中，采用步骤1)设计并制备的引物对待定量检测的基因稀有突变进行扩增，并利用实时荧光PCR仪进行定量检测；2)通过分析实时荧光PCR仪所记录的扩增曲线，即可获得基因稀有突变的定量检测信息。

主权项

1. 一种基因稀有突变的定量检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)根据需要定量检测的基因稀有突变，设计并制备相应的引物序列，引物的3’末端为突变位点特异核苷酸，除了最后一位核苷酸，其余序列均可通过商业合成，最后一位核苷酸为修饰核苷酸，使引物在常规PCR反应中无法延伸，修饰核苷酸添加至引物末端；2)在含有特定DNA聚合酶和焦磷酸的反应体系中，采用步骤1)设计并制备的引物对待定量检测的基因稀有突变进行扩增，并利用实时荧光PCR仪进行定量检测；3)通过分析实时荧光PCR仪所记录的扩增曲线，即可获得基因稀有突变的定量检测信息。