[发明专利]一种分离单个核细胞的方法和装置有效
申请号: | 200810089682.2 | 申请日: | 2008-04-14 |
公开(公告)号: | CN101560495A | 公开(公告)日: | 2009-10-21 |
发明(设计)人: | 胡祥;叶圣勤;李国喜;李建斌;邢培清;杜广有;程四国 | 申请(专利权)人: | 深圳市北科生物科技有限公司;河南省红十字血液中心 |
主分类号: | C12N5/08 | 分类号: | C12N5/08;C12M1/00 |
代理公司: | 北京元中知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 王明霞;俞昌华 |
地址: | 518057广东省深圳市高新技术产*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种分离单个核细胞的方法和装置,特别是一种分离脐带血、骨髓、外周血单个核细胞的方法和装置,无须在百级净化环境下即可分离单个核细胞,不受样本数量、体积限制,效率高,无污染,不仅可以用于实验室研究,也可以直接用于人体治疗,且结构简单,便于成批生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 分离 单个 细胞 方法 装置 | ||
【主权项】:
1、一种分离单个核细胞的方法,其特征在于,包括(1)、前处理将脐带血、骨髓或外周血离心,将上层富血小板血浆层除去,然后加入适量质量百分比浓度为6%的羟乙基淀粉溶液和生理盐水;使得血液的红细胞比积为50-65%,其中羟乙基淀粉溶液和生理盐水的体积比为1∶4-1∶5;(2)、加液将经过步骤(1)前处理过的脐带血、骨髓或外周血倒入淋巴细胞分离液中,保持脐带血、骨髓或外周血和淋巴细胞分离液的界面清晰,前处理过的脐带血、骨髓或外周血与淋巴细胞分离液的体积比为1∶1-2∶1,优选2∶1;所述淋巴细胞分离液为Ficoll-Hypaque混合溶液;(3)、离心将步骤(2)所得的液体离心;此时液体自上而下分为5层,分别为:含有少量血浆血小板的上清层、单个核细胞层、淋巴细胞分离液层、多核细胞层、红细胞层;(4)、分离将含有少量血浆血小板的上清层层、单个核细胞层、淋巴细胞分离液层的上部取出,即为富含单个核细胞的液体;(5)洗涤在富含单个核细胞的液体中加入生理盐水,离心,弃去上清液,再加入生理盐水,同样的条件下离心,弃去上清液;剩下的部分即为单个核细胞液。
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