[发明专利]一种利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法

摘要

本发明公开了一种利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法，涉及细菌的诱变选育过程及利用该菌株开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇。具体步骤是：对运动发酵单胞菌出发菌株进行诱变，得到能够在酸性条件下高产乙醇的运动发酵单胞菌；利用细菌进行开放式乙醇发酵，将粉碎后的餐厨垃圾与水按1－2∶1的质量比进行混合，并调节pH至4左右；将诱变的耐酸性运动发酵单胞菌接入餐厨垃圾进行开放式厌氧发酵；蒸馏乙醇。本发明所筛选出的运动发酵单胞菌能够在不易生长杂菌的酸性条件下生长并进行乙醇发酵，且整个反应过程不需要灭菌，大大降低了其运行成本。

主权项

1、一种利用耐酸性细菌开放式发酵餐厨垃圾生产乙醇的方法，其特征在于，具体实施步骤为：1)以运动发酵单胞菌Zymomonas mobilis 10225为出发菌株，利用0.05～0.10mol/L的HCl溶液调液体葡萄糖基础培养基的pH为3.5～4.5，加入琼脂，制成固体培养基，将运动发酵单胞菌活化三代后，采用双层涂布法在准备好的固体葡萄糖基础培养基中进行菌株筛选，选取生长旺盛的菌株进行三轮酸性驯化，选取生长能力强的一株菌，接入液体葡萄糖基础培养基，制成菌株悬液；2)将步骤1)的菌株悬液用无菌水稀释至每毫升106-108个细胞，取稀释液1～3ml置于培养皿中进行紫外照射，照射后，将诱变菌液在黑暗冷冻中保存1-2h，然后在红灯下稀释，在固体葡萄糖基础培养基上涂菌进行筛选，培养温度为30-35℃，时间为24-48小时，挑选长势良好的耐酸性运动发酵单胞菌株置于4℃左右的冰箱中保存；3)将粉碎后的餐厨垃圾与水按1-2∶1的质量比进行混合，用稀盐酸将其pH调节到3.5-4.5，得到餐厨垃圾的发酵培养基，按每克餐厨垃圾发酵培养基接入50-150U的糖化酶和蛋白酶，然后将步骤2制得的耐酸性运动发酵单胞菌接入液体葡萄糖基础培养基培养24～36h，得到接种液，并按照每100g餐厨垃圾发酵培养基5-10ml运动发酵单胞菌的比例接入经紫外诱变的耐酸性运动发酵单胞菌，在30-35℃的密闭发酵摇瓶中进行不灭菌的厌氧发酵，发酵时间为24-48小时，最后蒸馏提纯，得到乙醇。