[发明专利]一种构建膜蛋白cDNA文库的方法及其应用有效
| 申请号： | 200810119120.8 | 申请日： | 2008-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN101338454A | 公开（公告）日： | 2009-01-07 |
| 发明（设计）人： | 田志刚;葛葵葵;孙汭;魏海明 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/53;G01N21/64;G01N15/00 |
| 代理公司： | 北京科迪生专利代理有限责任公司 | 代理人： | 李新华;成金玉 |
| 地址： | 230026*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明涉及了一种构建膜蛋白cDNA文库方法及其应用。该方法构建了用于特异性筛选膜蛋白表达的真核表达载体pSecTag－attR，该表达载体可与任意带有λ噬菌体重组位点attL的cDNA克隆文库进行克隆重组获得cDNA表达文库，转染COS－1细胞后，通过进一步免疫荧光筛选对文库中表达膜蛋白克隆进行筛选，获得膜蛋白cDNA表达文库。作为该方法的应用，C57BL/6小鼠肝脏淋巴细胞膜蛋白cDNA文库被建立，通过对该文库进行鉴定分析，证明该方法是一种高通量特异性筛选膜蛋白的有效方案，为描绘特定组织细胞表面膜蛋白图谱以及研究未知膜蛋白提供了一种有力的手段。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 膜蛋白 cdna 文库 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1、一种构建膜蛋白cDNA文库的方法，包括以下步骤：A：用于筛选膜蛋白的真核表达载体的构建；B：cDNA表达文库的构建；C：cDNA表达文库稳定转染入细胞，获得稳定表达该文库的细胞株；D：表达该文库的细胞株经荧光筛选，获得膜蛋白特异的cDNA文库。
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