[发明专利]一种橡胶树花药愈伤组织玻璃化超低温保存方法无效
申请号: | 200810119863.5 | 申请日: | 2008-09-12 |
公开(公告)号: | CN101353639A | 公开(公告)日: | 2009-01-28 |
发明(设计)人: | 李哲;周权男;孙爱花;黄天带;黄华孙;林位夫 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院橡胶研究所 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 | 代理人: | 黄慧德 |
地址: | 57173*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | 本发明提供了一种橡胶树花药愈伤组织玻璃化超低温保存方法,包括如下步骤:将花药愈伤组织接种到预培养基中,暗培养2~3天,培养温度为25~28℃;然后在室温下用60%的PVS2处理花药愈伤组织10~30分钟;脱水处理后,在0℃下用PVS2处理20~40分钟,移去PVS2原液,再加入新的PVS2,在液氮中保存。花药愈伤组织复苏后,进行继代培养,进一步诱导胚状体及诱导成熟胚状体分化后可获得再生植株。本发明所涉及的液氮玻璃化超低温保存方法具有设备简便、实验程序简化、效果和重复性好等优点,可长期保存橡胶树花药愈伤组织,解冻后经培养得到再生植株,为橡胶树遗传转化创造条件。 | ||
搜索关键词: | 一种 橡胶树 花药 组织 玻璃化 超低温 保存 方法 | ||
【主权项】:
1.一种橡胶树花药愈伤组织的玻璃化超低温保存方法,其特征在于,包括如下步骤:1)预培养:将花药愈伤组织接种到预培养基中,暗培养2~3天,培养温度为25~28℃;2)装载:然后在室温下用60%的玻璃化溶液处理花药愈伤组织10~30分钟;3)脱水及冻存:脱水处理后,在0℃下用玻璃化溶液处理20~40分钟,并去除玻璃化溶液,最后再重新加入玻璃化溶液,于液氮中保存。
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